(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202111161981.4 (22)申请日 2021.09.3 0 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113773216 A (43)申请公布日 2021.12.10 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO： M 2019 957 2019.1 1.20 (73)专利权人 贵州大学 地址 550000 贵州省贵阳市花溪区松涛路 贵州大学南校区生 化工程中心 (72)发明人 康冀川　钱声艳　曾学波　钱一鑫　 卢永仲　陈丽庄　何张江　 (74)专利代理 机构 重庆强大凯创专利代理事务 所(普通合伙) 50217 专利代理师 张显琴(51)Int.Cl. C07C 229/22(2006.01) C07C 227/40(2006.01) C12P 13/04(2006.01) C12P 7/64(2022.01) A61P 35/00(2006.01) C12R 1/645(2006.01) 审查员 邢维伟 (54)发明名称 一种长链脂肪酸甘油醇类化合物Rubracin A、 制备方法及其应用 (57)摘要 本申请涉及微生物技术领域中的一种长链 脂肪酸甘油醇类化合物RubracinA， 结构如下式 所示： 所述化合物由红棕毛筒腔菌发酵提取后获得， 所 述红棕毛筒腔菌命名为红棕毛筒腔菌Tubeufia   rubra PF02‑2， 保藏单位： 中国典型培养物保藏 中心， 保藏编号为CCTCC  NO： M 2019957。 该化合 物具有制备肿瘤耐药逆转剂或肿瘤药物增敏剂 的用途。 权利要求书2页 说明书10页 附图6页 CN 113773216 B 2022.12.27 CN 113773216 B 1.一种长链脂肪酸甘油醇类化 合物Rubraci n A， 其特征在于： 结构如下式所示： 2.根据权利要求1所述化合物的制备方法， 其特征在于： 所述化合物由红棕毛筒腔菌发 酵提取后获得， 所述红棕毛筒腔菌命名为红棕毛筒腔菌Tubeufia  rubra PF02‑2， 保藏单 位： 中国典型培 养物保藏中心， 保藏编号 为CCTCC NO： M 2019957。 3.根据权利要求2所述化合物的制备方法， 其特征在于： 包括以下步骤： 将红棕毛筒腔 菌Tubeufia  rubra PF02‑2进行液体或固体发酵培养， 得到发酵物； 将发酵物萃取， 所得萃 取物经分离纯化， 得到 长链脂肪酸甘油醇类化 合物Rubraci n A。 4.根据权利要求3所述 化合物的制备 方法， 其特 征在于： 具体包括以下步骤： S1、 菌株活化： 取出保存的菌种， 接种在基础培养基平板上， 静置培养传代至第三代后 放大培养； S2、 发酵培养： 取步骤S1活化后的菌种接种在固体培养基中， 在26～30℃下静置发酵培 养一段时间； S3、 萃取： 取菌体连同培 养基， 加入乙酸乙酯萃取， 将萃取 液浓缩后得到发酵产物； S4、 发酵产物预处理： 用氯:甲＝1:1溶剂溶解发酵产物， 再与硅胶按质量比1:1～2混合 均匀， 待溶剂挥发后作为一次上柱样品， 再与硅胶粉和石油醚上分离柱， 分别采用石油醚、 氯仿、 乙酸乙酯和甲醇依 次梯度洗脱， 洗脱溶剂经旋转蒸发仪减压回收后， 用氯仿、 丙酮或 甲醇溶解， 在用薄层层析点板， 使用展开剂展开， 选择在紫外可见光分析仪下254nm或365nm 有荧光的液体， 再用8％硫酸乙醇香草醛显 色剂显色； 合并甲醇溶剂 洗脱液， 回收甲醇溶剂， 得到甲醇浸膏； S5、 纯化分离： a、 将甲醇层浸膏用甲醇溶剂溶解， 与硅胶按质量比1:1～3混合均匀， 待 溶剂挥发作上柱样品上预柱， 采用10％甲醇水进 行平衡反相中压柱， 加入含样品预柱， 采用 甲醇水依次10个梯度洗脱， 洗脱液经旋转蒸发仪回收溶剂后， 甲醇溶解后在用薄层层析点 板， 使用展开剂展开， 选择在紫外可见光分析仪下254nm或365nm有荧光的液体， 再合并8％ 硫酸乙醇香 草醛显色剂显灰黑色的组分， 得到Fr.1 1组分； b、 将组分Fr.11用甲醇溶剂溶解后， 与硅胶按质量比1:1～3混合均匀， 待溶剂挥 发后作 上柱样品上预柱； 采用30％甲醇水进 行平衡反相中压柱， 加入含样品预柱， 采用甲醇水依次 8个梯度洗脱， 洗脱液经旋转蒸发仪回收溶剂后， 甲醇溶解后在用薄层层析点板， 使用展开 剂展开， 选择在紫外可见光分析仪下254nm或365nm有荧光的液体， 再合并8％硫酸乙醇香草 醛显色剂显灰黑色的组分， 得到Fr.1 1‑6组分； c、 将Fr.11 ‑6用甲醇溶解， 与硅胶按质 量比1:1～3混合均匀， 待溶剂挥发后作上柱样 品， 再与硅胶 粉和氯:甲＝1:1溶剂混合上分离柱， 采用氯仿： 甲＝ 1:1等梯度洗脱， 洗脱液采 用薄层层析点板合并， 得到组分Fr.1 1‑6‑1； d、 将Fr.11 ‑6‑1采用正相硅胶柱层析， 采用乙:甲＝1:1等梯度洗脱， TLC点板合并得到 化合物Rubraci n A。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 113773216 B 25.根据权利要求4所述化合物的制备方法， 其特征在于： 步骤S2的固体培养基为燕麦培 养基， 将20 0g燕麦以及15 0mL双蒸水混合后获得。 6.一种权利要求1所述的化合物在制备肿瘤耐药逆转剂或肿瘤药物增敏剂中的应用， 其特征在于： 肿瘤药物为阿霉素， 肿瘤包括乳腺癌。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于： 所述肿瘤耐药逆转剂为转运泵抑制剂， 所 述转运泵抑制剂对耐药蛋白P糖蛋白和多药耐药蛋白中一种或几种具有抑制作用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 113773216 B 3