(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202111089860.3 (22)申请日 2021.09.16 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113712939 A (43)申请公布日 2021.11.30 (73)专利权人 浙江海洋大学 地址 316022 浙江省舟山市定海区临城街 道海大南路1号 (72)发明人 欧阳小琨 　梁建浩　凌俊红　 卢雨清　杨立业　 (74)专利代理 机构 浙江千克知识产权代理有限 公司 33246 专利代理师 贾森君 (51)Int.Cl. A61K 9/51(2006.01)A61K 47/61(2017.01) A61K 31/704(2006.01) A61P 35/00(2006.01) 审查员 冯瑶瑶 (54)发明名称 一种阿霉素偶联壳寡 糖的纳米粒子 (57)摘要 本发明利用壳寡糖(COS)和阿霉素(DOX)的 氨基与苯甲醛封端聚乙二 醇(DF‑PEG‑DF)的芳香 醛自发形成pH敏 感的苯亚胺键， 制备得到 具有pH 敏感的壳寡糖载药纳米粒子(COS ‑DOX)， 使其在 肿瘤弱酸性条件 下实现定点释放， 提高疗效和降 低药物的毒副作用。 权利要求书1页 说明书7页 附图5页 CN 113712939 B 2022.08.19 CN 113712939 B 1.一种阿霉素偶联壳寡糖纳米粒子的制备 方法， 其特 征在于包括以下步骤： 1） 首先将盐酸阿霉素DOX ·HCL溶于二甲基亚砜DMSO中， 得DOX ·HCL的DMSO溶液， 加入 二乙胺混合， 脱盐2  h， 加入壳寡糖COS的二甲基亚砜DMSO溶液， 充分搅拌5  min后， 在搅拌下 缓慢滴入0.5  mL 苯甲醛封端的聚乙二醇DF ‑PEG‑DF溶液， 室温下反应12  h； 2） 将上述反应液装入透析袋中， 在去离子水中透析24  h， 以去除未反应的DOX及小分 子， 得透析保留液； 3） 搅拌下向透析保留液中缓慢滴加三聚磷酸钠TPP溶液， 剧烈搅拌10  min， 反应液冷冻 干燥后获得COS ‑DOX； 所述步骤1） 中盐酸阿霉素DOX ·HCL与二甲基亚砜DMSO的重量体积比1mg/ml； 所述步骤1） 中二乙胺与阿霉素DOX ·HCL的摩尔比为2:1； 所述步骤1） 中 壳寡糖COS的二甲基亚砜DMSO溶 液的浓度为20  mg/mL ； 所述步骤1） 中苯甲醛封端的聚乙二醇D F‑PEG‑DF溶液为10w/w%D F‑PEG‑DF水溶液； 所述 步骤1） 中DOX ·HCL的DMSO溶 液与壳寡糖COS的二甲基亚砜DMSO溶 液的体积比为5:4； 所述步骤3)中的三聚磷酸钠TP P溶液为2 mg/L； 所述步骤3） 中三聚磷酸钠TPP溶液的添加量为4ml， 步骤1） 中的DOX ·HCL的添加量为 5mg。 2.如权利要求1中所述的方法制备 得到的阿霉素偶联壳寡糖纳米粒子 。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113712939 B 2一种阿霉素偶联壳寡糖的纳米粒子 技术领域 [0001]本发明涉及 一种载药纳米粒子， 具体涉及 一种阿霉素偶联壳寡糖纳米粒子及 其制 备。 背景技术 [0002]针对肿瘤细胞外微环境和细胞内细胞器的酸性环境， pH触发释药是药物传递中普 遍采用的策 略之一。 pH响应的传递系统可以被设计为细胞外和细胞内药物释放。 一般的pH 敏感性纳米载体通过在载体的聚合物中引入 可质子化基团、 酸不稳定键或pH 响应的“PEG脱 离”， 在细胞外或细胞内的低pH条件下实现药物释放， 从而促进细胞摄取和细胞内给 药。 [0003]有研究将其作为壳聚糖水凝胶的交联剂， 制备载药凝胶， 然而， 壳聚糖的水溶性很 差， 通常加入少量的盐酸或乙酸来溶解壳聚糖， 这会增加壳聚糖对正常组织的酸毒性且限 制对pH响应靶向给 药。 发明内容 [0004]本发明提供了一种阿霉素偶联壳寡糖纳米粒子的制备， 本发明利用壳寡糖 （COS） 和阿霉素 （DOX） 的氨基与苯甲醛封端聚乙二醇 （DF ‑PEG‑DF） 的芳香醛自发形成pH敏感 的苯 亚胺键， 制备得到具有pH敏感的壳寡糖载药纳米粒子 （C OS‑DOX） ， 本发 明制备得到阿霉素偶 联壳寡糖纳米粒子拥有良好的生物相容性、 生物降解性能， 其在肿瘤弱酸性条件下实现定 点释放， 提高疗效和降低药物的毒副作用。 [0005]一方面， 本发明提供了一种阿霉素偶联壳寡糖纳米粒子的制备， 其包括以下步骤： [0006]1） 首先将盐酸 阿霉素DOX ·HCL溶于二甲基亚砜DMSO中， 得DOX ·HCL的DMSO溶液， 加入二乙胺混合， 脱盐2  h， 加入壳寡糖COS的二甲基亚砜DMSO溶液， 充分搅拌5  min后， 在搅 拌下缓慢滴入0.5  mL DF‑PEG‑DF溶液， 室温下反应12  h； [0007]2） 将上述反应液装入透析袋中， 在去离子水中透析24  h， 以去除未反应的DOX及小 分子， 得透析保留液； [0008]3） 搅拌下向透析保留液中缓慢滴加TPP溶液， 剧烈搅拌10  min， 反应液冷冻干燥后 获得COS‑DOX。 [0009]作为优选， 所述步骤1） 中盐酸阿霉素DOX ·HCL与二甲基亚砜DMSO的重量体积比 1mg/ml。 [0010]作为优选， 所述 步骤1） 中二乙胺与阿霉素DOX ·HCL的摩尔比为2:1。 [0011]作为优选， 所述 步骤1） 中 壳寡糖 （COS） 二甲基亚砜 （DMSO） 溶 液的浓度为20  mg/mL。 [0012]作为优选， 所述 步骤1） 中DF ‑PEG‑DF溶液为10 w/w %DF‑PEG‑DF水溶液。 [0013]作为优选， 所述步骤1） 中DOX ·HCL的DMSO溶液与壳寡糖 （COS） 二甲基亚砜 （DMSO） 溶液的体积比为5:4。 [0014]作为优选， 所述 步骤3)中的TP P溶液的溶度为2  mg/L。 [0015]作为优选， 所述步骤3） 中TPP溶液与步骤1） 中的DOX ·HCL的DMSO溶液 的体积比为说　明　书 1/7 页 3 CN 113712939 B 3