(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202111258811.8 (22)申请日 2021.10.26 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113855696 A (43)申请公布日 2021.12.31 (73)专利权人 中山大学孙逸仙纪念医院 地址 510120 广东省广州市沿江西路107号 (72)发明人 张世能　郑丹丹　黄凤婷　庄燕妍　 (74)专利代理 机构 广州三环 专利商标代理有限 公司 44202 专利代理师 颜希文　郝传鑫 (51)Int.Cl. A61K 31/7088(2006.01) C12N 15/113(2010.01) A61P 35/04(2006.01)A61P 35/00(2006.01) 审查员 盛倩 (54)发明名称 一种靶向抑制cir c LATS2基因表达的siRNA 及其应用 (57)摘要 本发明涉及生物 技术领域， 具体公开了一种 靶向抑制cir cLATS2基因表 达的siRNA及其应用。 本发明提供环状RNA  circ0007590抑制剂在制备 治 疗 胰 腺 癌的 药 物 中 的 应 用 ， 环 状 R N A   circ0007590抑制剂包 括抑制cir c LATS2基因表 达的si‑circLATS2 ‑1、 si‑circLATS2 ‑2和si‑ circLATS2‑3中的至少一种， 三条siRNA有着较高 的干扰效率(>70％)； 在HPAF ‑II细胞系中， 敲低 环状RNA circ0007590的表达水平显著抑制胰腺 癌细胞的增殖、 迁移和侵袭水平， 即下调表达环 状RNA circ0007590可以抑制胰腺癌 细胞株的生 长。 权利要求书1页 说明书6页 序列表2页 附图2页 CN 113855696 B 2022.09.06 CN 113855696 B 1.环状RNA  circ0007590抑制剂在制备治疗胰腺癌的药物中的应用， 其特征在于， 环状 RNA circ0007590对应的亲本基因为LATS2 基因， 所述环 状RNA circ0007590抑制剂为如SEQ   ID NO.1所示的si ‑circLATS2 ‑1、 如SEQ ID NO.2所示的si ‑circLATS2 ‑2和如SEQ  ID NO.3 所示的si ‑circLATS2 ‑3中的至少一种。 2.一种胰腺癌的治疗药物， 其特征在于， 所述治疗药物包括环状RNA  circ0007590抑制 剂， 所述环状RNA  circ0007590抑制剂为如SEQ  ID NO.1所示的si ‑circLATS2 ‑1、 如SEQ ID  NO.2所示的si ‑circLATS2 ‑2和如SEQ ID NO.3所示的si ‑circLATS2 ‑3中的至少一种。 3.如权利要求2所述的治疗药物， 其特征在于， 所述治疗药物还包括药物上可接受 的载 体。 4.一种靶向抑制circLATS2基因表达的siRNA， 其特征在于， 所述siRNA包括si ‑ circLATS2‑1、 si‑circLATS2‑2和si‑circLATS2‑3中的至少一种， 所述 si‑circLATS2‑1的序 列如SEQ ID NO.1所示， 所述si ‑circLATS2 ‑2的序列如SEQ  ID NO.2所示， 所述si ‑ circLATS2 ‑3的序列如SEQ  ID NO.3所示。 5.如权利要求4所述的siRNA， 其特征在于， circLATS2基因的核苷酸序列如SEQ  ID  NO.4所示。 6.如权利要求 4或5所述的siRNA在制备治疗 胰腺癌药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113855696 B 2一种靶向抑制circ  LATS2基因表达的siRNA及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物技术领域， 尤其是涉及一种靶向抑制circLATS2基因表达的siRNA 及其应用。 背景技术 [0002]小RNA干扰(small  interference  RNA， RNAi)技术是近几年发展起来的一种阻抑 基因表达的新方法， 其是由与靶基因序列同源的双链RNA(dsRNA)引发的广泛存在于生物体 内的序列特异性基因转录后的沉默过程。 RNAi作用的高度特异性， 有可能特异地抑制致病 的突变等位基因， 但又不影响正常等位基因功能， 所以RNAi在基因治疗上有广阔的应用前 景。 [0003]RNAi作用机制是双链RNA(dsRNA)导入细胞后， 在Dicer酶的作用下， 裂解为21 ‑25 个核苷酸组成 的小干扰RNA(siRNA)， 并与细胞内核酸内外切酶、 解链酶、 Argonaute蛋 白等 结合， 形成具有多个亚单元的核糖核苷酸蛋白复合物 ‑RISC(RNA ‑inducing  silencing   complex)， 高效递进式介导细胞内源性的同源mRNA 的降解。 哺乳动物细胞内， 导入长双链 RNA可导致基因表达广泛抑制， 直接应用短双链的siRNA同样高效介导RNAi， 并避免非特异 性基因抑制效应。 且短双链si RNA通过化学方法易合 成， 操作简便、 转染效率高， 对细胞的或 者组织的毒副作用小， 可大规模制备， 临床应用方便， 在药物开发方面具有不可替代的优 势。 [0004]但是， 由于siRNA的碱基分布， 两端自由能大小及靶mRNA的二级结构等因素的影 响， 靶向同一基因mRNA不同靶点的siRNA， 封闭基因表达的效果明显不同。 在siRNA沉默特定 基因的实验中， 为保证 siRNA能高效降解靶mRNA， 一般需要针对靶基因设计合 成多条不同序 列的siRNA， 从中筛选出有效序列。 有效siRNA序列的设计筛选是siRNA介导RNAi实验的关键 点之一。 发明内容 [0005]本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种靶向抑制circ   LATS2基因表达的siRNA及其应用。 本发明设计的siRNA序列具有较高的干扰效率(>70％)， 降低环状RNA  circ0007590的表达水平， 进而使得抑制胰腺癌细胞的增殖、 迁移和侵袭水 平。 [0006]为实现上述目的， 本发明采取的技 术方案为： [0007]第一目的， 本发明提供了一种环状RNA  circ0007590抑制剂在制备治疗胰腺癌的 药物中的应用， 环状RNA  circ0007590对应的亲本基因为LATS2基因， 所述环状RNA   circ0007590抑制剂包括抑制circLATS2基因表达的siRNA。 [0008]作为本发明所述应用的优选实施方式， 所述siRNA包括si ‑circLATS2 ‑1、 si‑ circLATS2‑2和si‑circLATS2‑3中的至少一种， 所述 si‑circLATS2‑1的序列如SEQ  ID NO.1 所示， 所述si ‑circLATS2 ‑2的序列如SEQ  ID NO.2所示， 所述si ‑circLATS2 ‑3的序列如SEQ  说　明　书 1/6 页 3 CN 113855696 B 3