(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111221980.4 (22)申请日 2021.10.20 (71)申请人 浙江大学 地址 310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘 路866号 (72)发明人 彭丽华　徐阳　 (74)专利代理 机构 杭州求是专利事务所有限公 司 33200 代理人 郑海峰 (51)Int.Cl. A61K 9/127(2006.01) A61K 47/28(2006.01) A61K 31/713(2006.01) A61P 9/10(2006.01) A61P 9/12(2006.01)A61P 17/02(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种高效低毒且稳定性良好的用 于基因递 送的阳离 子脂质体及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种高效低毒且稳定性良好 的用于基因递送的空白脂质体及其应用。 本发明 利用植物甾醇类或人参皂苷类化合物替代胆固 醇作为膜稳定剂， 使其成为完整的膜结构中不可 缺少的结构组成部分， 而不是单纯地作为药物或 药物增效剂， 进而赋予了空白脂质体良好的稳定 性、 基因递送时高效低毒的特点以及特定疾病治 疗时的应用潜力。 本发明进一步提出了可有效提 高该空白脂质体在较长时间内保持稳定性的步 骤， 为其进一步的应用提供了保证与便利。 本发 明中的空白脂质体为阳离子脂质体， 具有制备工 艺简单， 膜表面带正电， 细胞毒性低， 递送效率 高， 稳定性良好 等优点。 权利要求书2页 说明书7页 附图5页 CN 114053225 A 2022.02.18 CN 114053225 A 1.一种高效低毒且稳定性良好的用于基因递送的空白脂质体， 其特征在于， 所述的空 白脂质体为阳离子脂质体， 所述的阳离子脂质体具有膜， 所述的膜包含膜稳定剂， 所述膜稳 定剂为植物甾醇类化 合物或人参皂苷类化 合物中的一种或多种， 其中， 植物甾醇类化 合物如式I所示： 其中， R1为 中的一种； 所述人参皂苷类化合物为人参皂苷PPT、 人参皂苷PPD、 人参皂苷Rb1、 人参皂苷Rh1、 人 参皂苷Rh2、 人参皂苷Rh3、 人参皂苷Rh4、 人参皂苷Rg1、 人参皂苷Rg2、 、 人参皂苷Rg3、 人参皂 苷Rg5、 人参皂苷Rk2中的一种或多种。 2.根据权利要求1所述的阳离子脂质体， 其特征在于， 所述的阳离子脂质体中不含胆 固 醇， 所述式 Ⅰ所示的植物甾醇类化合物或式II所示的人参皂苷类化合物代替胆固醇作为膜 稳定剂； 所述植物甾醇类化合物 为谷甾醇、 豆甾醇、 菜油甾醇、 菜籽甾醇、 燕麦甾醇中的一种 或多种。 3.根据权利要求1所述的阳离子脂质体， 其特征在于， 所述阳离子脂质体中， 还包括阳 离子脂质和助磷脂， 所述阳离子脂质包括溴化三甲基 ‑2,3‑二油酰氧基丙基铵、 氯化三甲 基‑2,3‑二油烯氧基丙基铵、 三氟乙酸二甲基 ‑2,3‑二油烯氧基丙基 ‑2‑(2‑精胺甲酰氨基) 乙基铵、 溴化三甲基十二烷基铵、 溴化三甲基十四烷基铵、 溴化三甲基十六烷基铵、 双十烷 基二甲基溴化铵、 溴化二甲基 ‑2‑羟乙基‑2,3‑二油酰氧基丙基铵、 溴化二甲基 ‑2‑羟乙基‑ 2,3‑二油烯氧基丙基铵、 溴化二甲基 ‑3‑羟丙基‑2,3‑二油烯氧基丙基铵)、 溴化二甲基 ‑4‑ 羟丁基‑2,3‑二油烯氧基丙基铵、 溴化二甲基 ‑5‑羟戊基‑2,3‑二油烯氧基丙基铵、 溴化二甲 基‑2‑羟乙基‑2,3‑双十六烷氧基丙基铵、 溴化二甲基 ‑2‑羟乙基‑2,3‑双十八烷氧基丙基 铵、 溴化二甲基 ‑2‑羟乙基‑2,3‑双十四烷氧基丙基铵、 N ‑(2‑精胺甲酰基) ‑N’,N’ ‑双十八烷 基甘氨酰胺、 1， 2 ‑二油酰‑3‑琥珀酰‑sn‑甘油胆碱酯、 3β ‑[N‑(N’， N’ ‑二甲基胺乙基)胺基甲 酰基]胆固醇、 脂质多聚 ‑L‑赖氨酸中的一种或多种； 助磷脂为二油酰基磷脂酰乙醇胺、 二油 酰磷脂酰胆碱、 磷脂酰胆碱、 卵磷脂、 磷脂酰乙醇胺中的一种或多种； 所述的阳离子脂质与 膜稳定剂的质量比为0.1:1 ‑50:1， 较佳地 为0.1:1‑30:1。 4.根据权利要求1所述的阳离子脂质体， 其特征在于， 所述阳离子脂质体中， 所述的阳 离子脂质与助磷脂的质量比为0.1:1 ‑50:1， 较佳地 为0.1:1‑30:1。 5.根据权利要求1 ‑4任一项所述的阳离子脂质体， 其特征在于， 所述阳离子脂质体采用权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114053225 A 2薄膜分散法、 真空干燥法、 逆相蒸发法或冻融法制备。 6.权利要求1 ‑4任一项所述的阳离子脂质体在制备负载活性物质的脂质体中的应用， 所述的负载活性物质的脂质体中的活性物质为核酸类药物， 所述的核酸类药物为siRNA， mRNA、 DNA中的一种或多种， 所述的负载活性物质的脂质体是指将核酸类药物中的一种或多 种包封于如权利要求1 ‑4任一项所述的空白脂质体中。 7.如权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述的阳离子脂质体与活性物质的质量比例 为0.1:1‑40:1， 较佳地 为0.5:1‑30:1。 8.如权利要求6所述的应用， 其特征在于， 在负载所述活性物质之前， 所述阳离子脂质 体采用冻干法 保持长时间的稳定性。 9.如权利要求8所述的应用， 其特征在于， 所述冻干法中采用的冻干保护剂为葡萄糖、 蔗糖、 乳糖、 海藻糖、 甘露醇中的一种或多种， 所述的冻干保护剂与阳离子脂质体的质量比 为0.1:1‑20:1， 较佳地 为0.1:1‑15:1。 10.如权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述负载活性物质的脂质体作为治疗动脉 粥样硬化、 高血压、 创伤或肿瘤治疗的药物。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114053225 A 3