(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111200169.8 (22)申请日 2021.10.14 (71)申请人 深圳大学总医院 地址 518055 广东省深圳市南 山区学苑大 道1098号深圳大 学总医院 (72)发明人 于力　王智鼎　 (74)专利代理 机构 北京预立 生科知识产权代理 有限公司 1 1736 代理人 李红伟　孟祥斌 (51)Int.Cl. C07K 14/725(2006.01) C07K 19/00(2006.01) C12N 15/12(2006.01) C12N 15/85(2006.01) C12N 5/10(2006.01)A61K 39/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/02(2006.01) A61P 37/04(2006.01) (54)发明名称 具有高亲和力的T细胞受体及其用途 (57)摘要 本发明公开了具有高亲和力的T细胞受体及 其用途， 同时还涉及编码T细胞受体的核酸， 包含 T细胞受体的核酸的载体以及经修饰的细胞、 嵌 合分子、 药物组合物及其制备预防和/或治疗肿 瘤的产品和筛 选检测抗原、 靶向引导中的用途。 权利要求书3页 说明书16页 序列表8页 附图1页 CN 113929767 A 2022.01.14 CN 113929767 A 1.一种分离 的T细胞受体， 其特征在于， 包含具有SEQ  ID NO： 5‑7任一所示的氨基酸序 列的α 链CDR3和/或具有SEQ  ID NO： 19氨基酸序列的β 链CDR3； 优选地， 所述T细胞受体还包含具有SEQ  ID NO： 1‑3任一所示的氨基酸序列的α链CDR1 和SEQ ID NO： 4所示的α 链CDR2； 和/或具有SEQ  ID NO： 17和SEQ  ID NO： 18所示的氨基酸序 列的β 链CDR 1和CDR2； 优选地， 所述T细胞受体包含与SEQ  ID NO:8‑16任一所示的氨基酸序列具有至少80％ 同一性的α 链可变区和/或与SEQ  ID NO:20所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的β 链可 变区； 优选地， 所述T细胞受体包含与SEQ  ID NO:8‑16任一所示的氨基酸序列具有至少90％ 同一性的α 链可变区和/或与SEQ  ID NO:20所示的氨基酸序列具有至少90％同一性的β 链可 变区； 优选地， 所述T细胞受体包含与SEQ  ID NO:8‑16任一所示的氨基酸序列具有至少95％ 同一性的α 链可变区和/或与SEQ  ID NO:20所示的氨基酸序列具有至少95％同一性的β 链可 变区； 优选地， 所述T细胞受体包含与SEQ  ID NO:8‑16任一所示的氨基酸序列具有至少99％ 同一性的α 链可变区和/或与SEQ  ID NO:20所示的氨基酸序列具有至少99％同一性的β 链可 变区； 优选地， 所述T细胞受体包含SEQ  ID NO:8‑16任一所示的氨基酸序列所示的α链可变 区， 和/或与SEQ  ID NO:20所示的氨基酸序列所示的β 链可变区； 优选地， 所述T细胞受体包含SEQ  ID NO:8所示的氨基酸序列所示的α链可变区， 和/或 与SEQ ID NO:20所示的氨基酸序列所示的β 链可变区； 优选地， 所述T细胞受体是缺乏跨膜结构域的可 溶性T细胞受体； 优选地， 所述T细胞受体结合M HC I和/或MHC II肽复合物； 优选地， 所述T细胞受体还 包含可检测标记； 优选地， 所述可检测标记包括酶、 放 射性核素、 荧 光染料、 发光物质、 生物素； 优选地， 所述T细胞受体还 包含治疗剂。 2.多价T细胞受体复合体， 其特 征在于， 包 含多个权利要求1所述的T细胞受体； 优选地， 所述多价T细胞受体复合体包 含2、 3、 4或更多个T细胞受体； 优选地， 所述多价T细胞受体复合体存在于 脂双层中或附着于 颗粒； 优选地， 所述多价T细胞受体通过接 头分子缀 合。 3.多肽， 其特征在于， 包含含有序列CDR1(SEQ  ID NO： 1、 SEQ  ID NO： 2或SEQ  ID NO： 3)、 CDR2(SEQ  ID NO： 4)和CDR3(SEQ  ID NO： 5、 SEQ  ID NO： 6或SEQ  ID NO： 7)的TCRα 多肽和/或 含有序列CDR 1(SEQ ID NO： 17)、 CDR2(SEQ  ID NO： 18)和CDR3(SEQ  ID NO： 19)的TCRβ 多肽； 优选地， 所述多肽包含与SEQ  ID NO： 8‑16任一所示的氨基酸序列具有至少90％同一性 的TCRα 多肽和/或与SEQ  ID NO： 20所示的氨基酸序列具有至少90％同一 性的TCRβ 多肽； 优选地， 所述多肽包含与SEQ  ID NO： 8‑16任一所示的氨基酸序列具有至少95％同一性 的TCRα 多肽和/或与SEQ  ID NO： 20所示的氨基酸序列具有至少95％同一 性的TCRβ 多肽； 优选地， 所述多肽包含具有SEQ  ID NO： 8‑16任一所示的氨基酸序列的TCRα多肽和/或 具有SEQ ID NO： 20所示的氨基酸序列的TCRβ 多肽；权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 113929767 A 2优选地， 所述多肽包含具有SEQ  ID NO： 8的氨基酸序列的TCRα多肽和/或具有SEQ  ID  NO： 20所示的氨基酸序列的TCRβ 多肽。 4.多核苷酸， 其特征在于， 编码权利要求1所述的T细胞受体、 权利要求2所述的多价T细 胞受体复合体或权利要求3所述的多肽； 优选地， 所述多 核苷酸是优化的密码子； 优选地， 所述多 核苷酸用于在目的宿主细胞中表达 。 5.表达载体， 其特 征在于， 包 含权利要求 4所述的多 核苷酸； 优选地， 所述表达载体是病毒载体； 优选地， 所述病毒载体是逆转录病毒载体或慢病毒载体； 优选地， 所述表达载体还 包含接头结构域； 优选地， 所述接 头结构域在所述TCRα 多肽与TCRβ 多肽之间； 优选地， 所述接 头结构域包 含一个或更多个切割位 点； 优选地， 所述 一个或更多个切割位 点被间隔区隔开。 6.宿主细胞， 其特征在于， 所述宿主细胞被改造成表达权利要求1所述的T细胞受体、 权 利要求2所述的多价T细胞受体复合体或权利要求3所述的多肽； 优选地， 所述细胞包 含大肠杆菌， 酵母， 昆虫细胞， 或哺乳动物细胞； 优选地， 所述细胞 是造血祖细胞或免疫细胞； 优选地， 所述免疫细胞 是T细胞或外周血淋巴细胞； 优选地， 所述T细胞 是CD8+T细胞、 CD4+T细胞或γ δT细胞； 优选地， 所述T细胞为幼稚T细胞、 中央记忆T细胞、 干细胞记忆T细胞、 效应记忆T细胞， 或其任何结合； 优选地， 所述细胞是NK细胞、 恒定NK细胞、 NKT细胞、 间充质干细胞(MSC)或诱导多能干 (iPS)细胞； 优选地， 所述细胞 是从脐带或血 液分离的； 优选地， 所述细胞 是同种异体或自体的。 7.嵌合分子， 其特征在于， 包含与非细胞底物、 毒素和/或抗体缀合的权利要求1所述的 T细胞受体或其 一部分； 优选地， 所述非细胞底 物选自下组： 纳米颗粒、 外泌体和其 他非细胞底 物。 8.药物组合物或试剂 盒， 其特征在于， 所述药物组合物或试剂 盒包括权利要求1所述的 T细胞受体、 权利要求2所述的T细胞受体复合体、 权利要求3所述的多肽、 权利要求4所述的 多核苷酸、 权利要求5所述的表达载体、 权利要求6所述的宿 主细胞或权利要求7所述的嵌合 分子； 优选地， 所述药物组合物还 包括药学上可接受的载体。 9.用于改造免疫细胞的方法， 其特征在于， 其包括使所述免疫细胞与权利要求5所述的 表达载体接触； 优选地， 所述免疫细胞 是T细胞、 外周血淋巴细胞、 NK细胞、 恒定NK细胞或NKT细胞； 优选地， 所述接触为 转染或转 导； 优选地， 所述方法进一 步包括对所述免疫细胞进行分选以分离经TCR改造的T细胞； 优选地， 所述方法进一步包括通过连续稀释进行T细胞克隆、 以及通过快速扩增方案扩权　利　要　求　书 2/3 页 3 CN 113929767 A 3