(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111168839.2 (22)申请日 2021.10.08 (71)申请人 江苏下蜀黄土农业科技有限公司 地址 212412 江苏省镇江市句容市下蜀镇 312国道财 校南大门对面 (72)发明人 潘剑　吕晓安　李玉广　张卿　 (74)专利代理 机构 江苏银创律师事务所 32 242 代理人 何震花 (51)Int.Cl. C07D 405/14(2006.01) C09K 11/06(2006.01) A61P 35/00(2006.01) G01N 21/64(2006.01) (54)发明名称 基于醌氧化还原酶的茶叶提取物EGCG前药 及其制备方法和应用 (57)摘要 本发明公开了醌氧化还原酶茶叶提取物 EGCG前药的制备方法及其应用， 本发明的醌氧化 还原酶茶叶提取物EGCG前药的制备方法， 包括如 下步骤： (1)化合 物1的合成； (2)化合物2的合成； (3)化合物 3的合 成； (4)化合物4的合成， 制得褐色固体醌氧化还 原酶茶叶提取物EGCG前药。 本发明采用由茶叶中 提取的EGCG进行位点修饰， 得到对 NQO1特异性响 应的EGCG前药。 该前药表现出显著的原位检测性 质以及抗肿瘤活性， 同时， 由于该EGCG是由茶叶 中提取而来， 其毒副作用相对较低， 并且水溶性 更好， 更加有利于人体组织的吸收及代谢。 权利要求书2页 说明书6页 附图2页 CN 114195767 A 2022.03.18 CN 114195767 A 1.一种醌氧化还原酶茶叶提取物EGCG前 药， 其特征在于如式(I)所示： 2.权利要求1所述的醌氧化还原酶茶叶提取物EGCG前药的制备方法， 其特征在于包括 如下步骤： (1)化合物1(2 ‑(4‑((((2R,3R) ‑5,7‑dihydroxy ‑2‑(3,4,5‑trihydroxyphenyl)ch   roman‑3‑yl)oxy)carbon yl)‑2,6‑dihydroxyphenoxy)acetic  acid)的合成： 将EGCG溶解于 DMF中， 冰浴条件下加入溴乙酸和KI， 随后保持温度反应1h； 然后从25℃升高温度至80℃后 反应过夜， TLC检测反应结束； 反应结束后， 减压浓缩得到相应粗产 物， 用硅胶柱层析进 行色 谱纯化， 制得化 合物1； (2)化合物2(1 ‑ethyl‑4‑methylpyridin ‑1‑ium)的合成： 称取对甲基吡啶溶于适量乙 腈中， 随后加入碘乙烷， 82℃搅拌反应12小时； 然后 真空下除去溶剂， 加入适量乙醚超声震 荡， 析出固体， 抽滤制得化 合物2的白色固体； (3)化合物3((E) ‑4‑(2‑(1H‑indol‑3‑yl)vinyl) ‑1‑ethylpyri din‑1‑ium)的合成： 称 取化合物3溶于适量甲醇中， 随后加入3 ‑吲哚甲醛， 65℃下搅拌反应5分钟， 随后加入哌啶； 然后65℃搅拌反应12小时， 反应完成后冷却至室温， 加入乙酸乙酯搅拌， 析出固体， 抽滤制 得褐色固体；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114195767 A 2(4)化合物4(4 ‑((E)‑2‑(1‑(2‑(4‑((((2R,3R) ‑5,7‑dihydroxy ‑2‑(3,4,5‑ trihydroxyphenyl)chroman ‑3‑yl)oxy)carbonyl) ‑2,6‑dihydroxyphenoxy)acet yl)‑1H‑ indol‑3‑yl)vinyl) ‑1‑ethylpyridin ‑1‑ium)的合成： 称取化合物1溶于10ml二氯甲烷， 随 后加入1.5倍当量的DMAP， EDC.HCl， 冰水浴活化1.5小时， 然后加入化合物， 常温搅拌反应6 小时， 反应完成后冷却至室温， 真空除去溶剂， 使用二氯甲烷和甲醇柱层析， 制得褐色固体 醌氧化还原酶茶叶提取物EGCG前 药。 3.根据权利要求1所述的醌氧化还原酶茶叶提取物EGCG前药的制备方法， 其特征在于： 在步骤(1)中， 所述的EGCG与DMF的摩尔体积比为10mmol： 25ml， 所述的溴乙酸与KI的摩尔比 为15： 1。 4.根据权利要求2所述的醌氧化还原酶茶叶提取物EGCG前药的制备方法， 其特征在于： 在步骤(2)中， 所述的对甲基吡啶与碘乙烷的摩尔比为1： 1。 5.根据权利要求3所述的醌氧化还原酶茶叶提取物EGCG前药的制备方法， 其特征在于： 在步骤(3)中， 所述的化合物3与3 ‑吲哚甲醛的摩尔比为 1： 1； 所述的哌啶与乙酸乙酯的体积 比为1ul： 2ml。 6.根据权利要求4所述的醌氧化还原酶茶叶提取物EGCG前药的制备方法， 其特征在于： 在步骤(4)中， 中， 所述的化合物1、 DMAP、 EDC.HCl和化合物3为质量比为103： 25： 38： 50， 所述 的二氯甲烷和甲醇的体积比为20： 1。 7.根据权利要求1所述的醌氧化还原酶茶叶提取物EGCG前药的制备方法， 其特征在于： 在步骤(1)中， 所述的EGCG为10mmol， DMF为25ml； 所述的溴乙酸为201mg， 15mmol， KI为 1mmol； 在步骤(2)中， 所述的对甲基吡啶为500mg， 碘乙烷为850mg； 在步骤(3)中， 所述的化 合物3为290mg； 所述的3 ‑吲哚甲醛为245mg， 所述的哌啶为200 μl， 所述的乙酸乙酯为400ml； 所述的化合物2的白色固体为540mg； 在步骤(4)中， 所述的化合物1为412mg， 所述的DMAP为 100mg， EDC.H Cl为152mg， 化 合物3为20 0mg。 8.权利要求1至7任一项所述的醌氧化还原酶茶叶提取物EGCG前药在制备检测肿瘤内 环境中过表达的醌氧化还原酶N QO1的药物中的应用。 9.根据权利要求8所述的应用， 其特征在于： EGCG前药具有对醌氧化还原酶响应的作 用。 10.权利要求1至7任一项所述的醌氧化还原酶茶叶提取物EGCG前药在制备抗肿瘤活性 的药物中的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114195767 A 3