(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202111107312.9 (22)申请日 2021.09.2 2 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113755495 A (43)申请公布日 2021.12.07 (73)专利权人 陈天睿 地址 102600 北京市大兴区礼贤镇大礼路2 号二层0420室 (72)发明人 张冬久　申冬昌　 (74)专利代理 机构 江苏长德知识产权代理有限 公司 32478 专利代理师 刘威威 (51)Int.Cl. C12N 15/113(2010.01) C12N 15/867(2006.01)C12N 5/10(2006.01) C07K 14/475(2006.01) C07K 16/28(2006.01) A61K 31/444(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61K 48/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) 审查员 马俊凯 (54)发明名称 基因编辑 技术在治疗癌症中的应用 (57)摘要 本发明涉及基因编辑技术在治疗癌症中的 应用。 本发明通过针对VEGF靶点设计gRNA， 在乳 腺癌细胞中特异性的敲除了VEGF基因， 通过蛋白 检测发现敲除效果较好， VEGF蛋白得到了很好的 抑制。 此外， 所述VEGF基因敲除后的乳腺癌细胞 再联合PD ‑1单克隆抗体治疗后， 乳腺癌肿瘤得到 了更好的抑制， 具有较好的治 疗效果。 权利要求书1页 说明书6页 序列表2页 附图3页 CN 113755495 B 2022.09.06 CN 113755495 B 1.VEGF抑制剂和PD ‑1单克隆抗体在制 备用于抑制卵巢癌的药盒中的用途， 其中， VEGF 抑制剂为敲除V EGF的CRISPR/cas9系统元件组成， 其中gRNA序列为TCTA CCTCCACCATGCCAAG； PD‑1单克隆抗体的轻链可变区如SEQ  ID NO： 2所示， 重链可变区的序列如SEQ  ID NO： 3所 示。 2.如权利要求1所述的用途， 其特征在于所述PD ‑1单克隆抗体包括Fab， Fab ’， F(ab) 2、 Fv片段、 F(ab ’) 2、 scFv、 di ‑scFv或dAb。 3.如权利要求2所述的用途， 其特 征在于所述单 克隆抗体为全人源抗体。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113755495 B 2基因编辑技术在治疗癌症中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物领域， 更 具体的， 涉及一种基因编辑 技术在治疗癌症中的应用。 背景技术 [0002]世界卫生组织国际癌症研究机构(IARC)发布的2020年全球最新癌症负担数据显 示， 乳腺癌新增人数高达226万， 正式取代肺癌， 成为全球发病 率第一大癌症！ 在我国， 乳腺 癌发病率居所有女性恶性肿瘤首位。 据 《2015中国肿 瘤登记年报》 数据显示， 我国女性乳腺 癌发病率为42.55/10万人， 预计到2021年， 中国乳腺癌患者将高达250万。 乳腺癌成为女性 健康的第一杀手， 不可忽视。 乳腺癌的整体发病率大约是0.7％。 我国每年大约有30万人发 现乳腺癌， 而且我国乳 腺癌患者在逐年增加， 每年 发病率大约有1％到2％的增长。 乳腺癌是 女性最常见的恶性肿瘤， 大约占17％， 一些大城市中乳 腺癌占女性恶性肿瘤的第一位。 乳 腺 癌的病因目前仍不清楚。 目前研究表明雌激素与乳腺癌的发病有直接关系。 20岁前得乳腺 癌的概率很低， 20岁以后的发病率逐渐升高。 最高的是45到50岁左右的年 纪。 当一级亲属中 有人患有乳腺癌， 那么发病率会是一般人的2到 3倍。 [0003]随着医学科学的发展、 新的药物及新的治疗方式的出现， 目前乳腺癌的治疗方式 主要包括切除病灶的手术治疗、 放疗、 化疗、 内分泌 治疗等。 [0004]切除原发病灶手术是指将带有癌细胞的一侧乳房进行切除， 这样对防止癌细胞扩 散更有效。 对于早期或局部中晚期的乳腺癌可以采取此手术进行治疗， 甚至有些早期乳腺 癌的病人 可通过手术治疗达 到治愈的目的。 [0005]化疗这是治疗乳腺癌的常见治疗之一， 包括三种情况： 第一， 当病人的肿瘤发生淋 巴结转移或到乳腺癌中晚期的时候， 需要进 行化疗； 其次， 可以先通过化疗缩小某些较大的 乳腺癌肿瘤， 再进行手术达到根治的目的， 成为 “新辅助化疗 ”； 第三， 有的病人在切除手术 后发现有肿瘤细胞的残留， 也可以通过化疗提高生存率， 成为 “术后化疗 ”。 但需要注意， 化 疗会对人体产生一定的副作用， 如食欲 下降、 恶心呕吐等， 不过在 对症治疗后可以得到明显 改善。 [0006]放射治疗是对手术的一种补充或对晚期、 复发病例的治疗， 通过放射线来局部照 射， 将这部 分细胞灭活或杀死。 放疗常见副作用包括局部 皮肤发生改变， 热灼伤、 脱皮、 皮肤 变硬、 颜色改变等， 或者是对周围组织带来影响， 如胸部照射会出现肋骨炎症、 影响肺的纤 维化等。 [0007]内分泌治疗通过改变人体内雌性激素的水平或改变激素作用的方式来达到治疗 目的， 是治疗乳腺癌的一种辅助手段， 不能单独使用， 一般用于病人术后， 通过病 人长期服 药， 从而提高病人 的生存期。 内分泌治疗的副作用相对化疗也会小一些， 并且可以控制。 不 过乳腺癌病 人在进行内分泌治疗时， 要在医生的诊断和指导下制 定用药量， 切 不可盲目使 用， 危害生命健康。 [0008]近年来， 单克隆抗体药物是治疗HE R2阳性乳腺癌的重要药物。 曲妥珠单抗： 是全球 首个针对HER ‑2人源化单克隆抗体， 与HER2受体胞外 Ⅳ区域特异性结合， 抑制HER2受体活说　明　书 1/6 页 3 CN 113755495 B 3