(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111077958.7 (22)申请日 2021.09.15 (71)申请人 苏州冀玖生物科技有限公司 地址 215000 江苏省苏州市相城区高铁新 城青龙港路60号港口大厦12层1204-1 室 (72)发明人 杨耿　李平　舒妤　钟欣妤　 刘兴柱　 (74)专利代理 机构 南京禾易知识产权代理有限 公司 32320 代理人 詹庆铷 (51)Int.Cl. C12N 15/113(2010.01) A61K 31/7125(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 特异性修饰的脱氧核苷酸短链及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种特异性修饰的脱氧核苷 酸短链， 其特征在于其核苷酸序列为： 5 ’‑ CGGGGACTCGCTCCGTTCCTCTTC ‑3’， 其中5’端的前 三个碱基CGG、 3 ’端的最后三个碱基TTC进行硫代 修饰， 本发 明的核苷酸短链通过特异性的结合端 粒酶RNA后， 细胞内RNaseH能够识别DNA ‑RNA杂 链， 并能够降解其中的RNA链， 因此也就可以降解 细胞内的端粒RNA， 致使细胞内的端粒酶无法发 挥作用， 最终导致肿瘤细胞的凋亡。 该发明已经 可成功应用于人胃癌细胞、 宫颈癌细胞、 肝癌细 胞、 乳腺癌、 JurkatT细胞的端粒 酶RNA的敲低， 并 且观察到了显著的细胞凋亡现象， 表明该核苷酸 短链具有广谱 而有效的抗肿瘤前 景。 权利要求书1页 说明书4页 附图3页 CN 114015685 A 2022.02.08 CN 114015685 A 1.一种特异性 修饰的脱氧核苷酸短链， 其特 征在于其核苷酸序列为： 5’ ‑CGGGGACTCGCTCCGTTCCTCTTC ‑3’， 其中5’端的前三个碱基CGG、 3 ’端的最后三个碱基 TTC进行硫代修饰， 修饰结构如下： 2.权利要求1所述的特异性 修饰的脱氧核苷酸短链在敲低端粒RNA中的应用。 3.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于其步骤为： 将特异性修饰的脱氧核苷酸短链 转染到目标细胞中。 4.权利要求1所述的特异性修饰的脱氧核苷酸短链在制备治疗杀伤癌症细胞的药物中 的应用。 5.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于： 所述癌症细胞为胃癌细胞、 宫颈癌细胞、 肝 癌细胞、 乳腺癌或Jurkat  T细胞。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114015685 A 2特异性修饰的脱氧核 苷酸短链 及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及一种特异性 修饰的脱氧核苷酸短链及其应用。 背景技术 [0002]端粒(Telomere)是存在 于真核细胞线性染色体末端的一小段D NA‑蛋白质复合体， 构成了特殊的 “帽子”结构， 主要功能是保持染色体的完整性与稳定性， 是维持细胞正常生 理功能所必须的特殊DNA序列。 在正常细胞中， 细胞每分裂一次， 染色体顶端的端粒就缩短 一次， 随着细胞分裂次数的增加， 其端 粒磨损越多， 细胞寿命越短。 当端 粒不能再缩短时， 细 胞就无法继续分裂了， 进而开始走向衰老或者凋亡途径。 因此， 端粒被科学家们视为 “生命 时钟”。 [0003]然而， 癌细胞具有无限增殖的能力， 这些细胞在不断的复制过程中， 其端粒没有缩 短， 更没有进入衰老或者细胞凋亡途径。 科学家们研究发现恶性肿瘤细胞能够维持其端粒 完整性的主要原因是肿瘤细胞具有高活性的端粒酶。 比如， 目前已经发现的端粒酶阳性的 肿瘤有： 卵巢癌、 淋巴瘤、 急性白血病 、 乳腺癌、 结肠癌、 肺癌等。 [0004]端粒酶是一种特殊的逆转录酶， 由RNA和逆转录酶(TERT)组成一个RNA蛋白复合 体。 逆转录酶(TERT)是以自身携带的RNA为模板， 合成端粒重复序列， 加到新合成DNA链末 端， 负责端 粒的延长。 因此， 端 粒酶可以把DNA复制损失的端 粒填补起来， 藉由把端 粒修复延 长， 可以让端 粒不会因细胞分裂而有 所损耗， 使细胞分裂的次数无限增加。 正是基于这种机 制， 癌细胞就能够依赖其细胞内 高活性的端粒酶使自身的DNA在复制过程中不被缩短。 [0005]因为端粒酶在肿瘤细胞中具有高活性， 而在绝大部分正常细胞中不具有活性。 因 此针对端粒酶活性的治疗方案能够选择性的杀死肿瘤细胞， 显著降低对正常细胞的毒性。 目前， 对于抑制端粒酶活性的药物研发中， 主要集中在针对于小分子抑制剂的研发。 例如， 核苷类逆转录酶抑制剂ddG和AZT， 通过与单核苷酸三磷酸竞争性结合端粒酶， 抑制端粒酶 的逆转录过程。 [0006]然而， 目前针对抑制端粒RNA在细胞内的含量从而抑制端粒酶活性的相关研究还 比较缺乏。 因此， 本发 明从抑制端粒RNA入手， 设计了一种特异性结合端粒RNA的DNA序列， 这 个DNA‑RNA杂链能够在细胞内RNase  H的作用下， 降解其中的RNA， 从而使端粒RNA在细胞内 的含量显著下降， 导 致端粒酶失去自身RNA模板， 最终不能够延长端粒进 而引起细胞凋亡。 发明内容 [0007]本发明的目的是提供一种特异性修饰 的脱氧核苷酸短链， 可以使端粒RNA在细胞 内的含量显著下降。 [0008]本发明采取的技术方案为： 一种特异性修饰的脱氧核苷酸短链， 其特征在于其核 苷酸序列为： 5 ’ ‑CGGGGACTCGCTCCGTTCCTCTTC ‑3’， 其中5’端的前三个碱基CGG、 3 ’端的最后 三个碱基T TC进行硫代修饰， 修饰结构如下：说　明　书 1/4 页 3 CN 114015685 A 3