(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111239566.6 (22)申请日 2021.10.25 (71)申请人 南通大学附属医院 地址 226001 江苏省南 通市西寺路20号 (72)发明人 张丽丽　杨圣菊　蔡恒骥　季周婧　 张捷　 (74)专利代理 机构 上海申浩 律师事务所 31280 代理人 贾师英 (51)Int.Cl. C12N 15/113(2010.01) A61K 31/713(2006.01) A61K 45/06(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) (54)发明名称 用于抑制PR R14基因的siRNA分子 (57)摘要 本发明公开了一种用于抑制PRR14基因的 siRNA分子， 由正义链SEQ  ID NO:1和反义链SEQ   ID NO:2组成。 本发明的siRNA分子 可用于制备治 疗皮肤鳞 状细胞癌的药物。 权利要求书1页 说明书7页 序列表4页 附图5页 CN 114085832 A 2022.02.25 CN 114085832 A 1.一种用于抑制PR R14基因的siRNA分子， 由如下序列的正 义链和反义链组成： 正义链： 5’ ‑CAAUCAGGUUGAACAAGAANn‑3’(SEQ ID NO:1)， 反义链： 5 ’ ‑UUCUUGUUCAACCUGAUUGNn‑3’(SEQ ID NO:2)， 其中， 正义链和反义链中的N相同或者不同， 并且各自独立地是胞嘧啶C、 尿嘧啶U、 鸟嘌 呤G、 腺嘌 呤A、 脱氧胞嘧啶dC、 脱 氧鸟嘌呤dG、 脱氧腺嘌呤dA或脱 氧胸腺嘧啶dT； n代表 N的个 数， n是0、 1或2。 2.如权利要求1所述的siRNA分子， 其特 征在于， 所述 n为0， 即 正义链： 5’ ‑CAAUCAGGUUGAACAAGAA‑3’(SEQ ID NO:3)， 反义链： 5 ’ ‑UUCUUGUUCAACCUGAUUG‑3’(SEQ ID NO:4)。 3.如权利要求1所述的siRNA分子， 其特 征在于， 所述 N为dT， n为2， 即 正义链： 5’ ‑CAAUCAGGUUGAACAAGAAdTdT‑3’(SEQ ID NO:5)， 反义链： 5 ’ ‑UUCUUGUUCAACCUGAUUGdTdT‑3’(SEQ ID NO:6)。 4.如权利 要求1‑3中任一项所述的siRNA分子在制备用于抑制PRR14表达的药物中的用 途。 5.如权利要求 4所述的用途， 其特 征在于， 所述药物是治疗皮肤鳞状细胞癌药物。 6.如权利要求5所述的用途， 其特征在于， 所述治疗皮肤鳞状细胞癌药物用于抑制皮肤 鳞状细胞癌细胞的生长、 转移， 或者 促进皮肤鳞状细胞癌的凋亡。 7.一种RHAi药物， 其特征在于， 包含如权利要求1 ‑3中任一项所述的siRNA分子作为药 物活性成分以及药 学上可接受的载体。 8.如权利要求7 所述的RHAi药物， 其特 征在于， 所述药物是注射剂型或外用药剂型。 9.如权利要求8所述的RHAi药物， 其特征在于， 外用药剂型选自冻干剂、 水剂、 涂液、 凝 胶剂、 软膏、 乳膏、 霜剂。 10.如权利要求7 所述的RHAi药物， 其特 征在于， 还 包含其他抗癌药物活性成分。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114085832 A 2用于抑制P RR14基因的siRNA分子 技术领域 [0001]本发明属于生物医药领域， 具体涉及一种用于抑制PRR14基因的siRNA分子及其在 制备抗肿瘤药物中的用途。 背景技术 [0002]人皮肤鳞状细胞癌(cutaneous  squamous  cell carcinoma， cSCC)起源于表皮或 附属器角质形成细胞， 是具有侵袭性和潜在恶性的皮肤肿瘤， 占恶性上皮性肿瘤的15％， 占 非黑色素皮肤肿 瘤的20％， 仅此于基底细胞癌。 cSCC发病因素复杂， 可能与紫外线照射、 某 些化学品的接触、 癌前期皮肤病、 外伤、 瘢痕和免疫抑制剂的应用有关， 但其具体发病机制 尚不清楚。 在大多数情况下， cSCC很容易通过单纯切除或放射治疗达到治愈， 然而， 局部晚 期肿瘤也可出现局部复发， 淋巴结或远处转移。 常规采用手术、 激光、 冷冻、 放疗等治疗方 法， 但存在组织结构破坏性大、 易复发、 复发后再次治疗困难等问题。 因此， 研究皮肤癌发生 机制、 治疗手段和预防复发及转移是目前皮肤科 领域亟需解决的关键 。 [0003]富含脯氨 酸的蛋白质14(Proline ‑rich protein 14， PRR14)是富含脯氨酸蛋白质 家族的一个成员， 该家族包含一个富含脯氨 酸的区域， 两侧有N端和C端的核定位信号， 富含 脯氨酸的区域通常通过与各种结构域(尤其是SH3结构域)的结合而参与到多种信号通路。   PRR14被认 为是核纤层的一个新组成部 分， 在细胞周期中将异染色质拴在 核纤层上， 在细胞 周期过程中具有特异性和定位异染色质的能力。 PRR14很可能是肿瘤发生过程中介导核形 态改变及其功能改变的共同机制中的一个关键分子。 有报道指出， PRR14在非小细胞肺癌 (Non‑small cell lung cancer， NSCLC)患者的肿瘤组织中异常过表达， 并与预后不良相 关， 通过激活PI3K/AKT/mTOR信 号通路促进肺癌细胞增殖。 PRR14作为一种富含脯氨酸的蛋 白质， 与GRB 2的Src同源3(Src  homology  3， SH3)结构域结合， 导致PI3K活化， 可能是一种新 的PI3K通路激活剂， 促进了肺癌的发生。 结果提示， PRR14可作为一个独立的预后指标， 在 NSCLC的治疗中可能成为一个潜在的治疗靶点。 还有研究指出， PRR14  在结肠癌组织细胞中 也呈高表达， 其高表达水平与肿瘤大小、 远处转移及淋巴结转移分期有关。 功能研究显示抑 制PRR14的表达可以抑制结肠癌细胞的生长、 迁移和侵袭。 此外，  PRR14的敲除抑制了上皮 ‑ 间充质转化(EMT)过程、 细胞周期相关蛋白的表达和p ‑AKT 水平。 最新研究发现， PRR14在乳 腺癌中过度表达， 参与乳腺癌的发生， PRR14表达增加促进乳腺癌细胞增殖和肿瘤形成。 PRR14在乳腺癌中通过激活PI3K/Akt/mTOR途径和抑制CHEK2途径 来保护细胞免受凋亡和刺 激增殖。 [0004]RNA干扰(RNA  interference， RNAi)是指在进化过程中高度保守、 由双链RNA   (double‑stranded  RNA， dsRNA)诱发的、 同源信使RNA(message  RNA， mRNA)高效特异性降解 的基因转录后沉默现象。 近年来， RNAi作为一个基因治疗技术， 得到了迅速发展， 尤其在抗 病毒、 抗肿瘤和抗炎症等医药领域显示出广阔的应用前景， 已经部 分RNAi 药物已进入临床 试验阶段。 小干扰核 酸(small  interfering  RNA， siRNA)是RNAi的效应分子， 由两 条互补的 RNA单链构成， 长21～23个核苷 酸(nt)。 由于RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表说　明　书 1/7 页 3 CN 114085832 A 3