(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202111066126.5 (22)申请日 2021.09.13 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113667032 A (43)申请公布日 2021.11.19 (73)专利权人 中山大学 地址 510275 广东省广州市海珠区新港西 路135号 专利权人 广东呀依山珍稀药 材种植有限公 司 (72)发明人 赵志敏　杨得坡　周洋　钟镜堂　 (74)专利代理 机构 深圳市创富知识产权代理有 限公司 4 4367 专利代理师 高冰(51)Int.Cl. C08B 37/00(2006.01) A61K 31/715(2006.01) A61K 33/04(2006.01) A61P 31/04(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (56)对比文件 WO 2007109852 A1,20 07.10.04 审查员 韩宁宁 (54)发明名称 硒化阳春砂仁多糖及其制备方法和应用 (57)摘要 本发明公开了硒化阳春砂仁多糖及其制备 方法和应用， 硒化阳春砂仁多糖由阳春砂仁粗多 糖AVP经硒化修饰得到。 该硒化多糖可以有效地 补充有机硒， AVP不具有抗幽门螺杆菌和抗肿瘤 活性， 与硒化前的AVP相比， 经硒化修饰后SAVP 对 幽门螺杆菌的MIC值为250μg/mL， MDA ‑MB‑231细 胞的IC50为375±32.5μg/mL， 产生了新的活性， 具有意料之外的效果， 有望进一步扩展硒化阳春 砂仁多糖的应用范围。 权利要求书1页 说明书6页 附图2页 CN 113667032 B 2022.06.07 CN 113667032 B 1.硒化阳春砂仁多糖， 其特征在于： 由阳春砂仁粗多糖AVP经硒化修饰得到， 其制备方 法包括： S1)取阳春砂仁粗多糖A VP， 加入浓度不超过1%的硝酸溶 液， 充分搅拌 反应， 得反应液A； S2)在反应液A中加入BaCl2和亚硒酸钠， 5 0～90℃充分反应， 得反应液B； S3)沉淀去除反应液B中的Ba2+离子， 取澄清液； S4)调节澄清液的pH 至中性， 浓 缩， 透析纯化， 得纯化多糖液； S5)将纯化多糖液中的多糖分离， 干燥， 得到硒化阳春砂仁多糖； 其中 所述阳春砂仁粗多糖A VP的制备 方法如下： （1） 阳春砂种子去壳取种子团， 粉碎， 取200  g粉碎后的阳春砂粉末， 加入4  L 95%乙醇， 提取温度80  ℃， 提取3  h， 重复操作三次， 最后将阳春砂粉末烘干， 得阳春砂 脱脂粉末； 往 阳 春砂脱脂粉末中加水， 200  g阳春砂脱脂粉末加4  L水， 提取温度95  ℃提取3 h， 重复操作3 次， 再将水提液于 60 ℃下减压浓 缩， 得浓缩液； （2） 向浓缩液中加入4倍体积的无水乙醇， 于4  ℃下静置12  h， 沉淀多糖， 然后 离心收集 沉淀， 离心转速为5000  rpm， 离心时间为5  min， 再将沉淀物溶解于蒸馏水中， 得到多糖溶 液； （3） 向多糖溶液中加入4倍体积的Sevage试剂， 所述Sevage试剂为氯仿： 正丁醇体积比= 4:1的溶剂， 剧烈震荡后离心， 离心转速为5000  rpm， 离心时间为10  min， 取上清液， 重复操 作， 直至完全去除蛋白； 随后将去除蛋白的多糖溶液在50  ℃下浓缩至无有机试剂味， 之后 冷冻干燥， 得到阳春砂仁粗多糖A VP。 2.根据权利要求1所述的硒化阳春砂仁多糖， 其特征在于： 所述阳春砂仁粗多糖AVP与 硝酸溶液的质量比为1： (5 0～150)。 3.根据权利要求1所述的硒化阳春砂仁多糖， 其特征在于： 所述硝酸溶液的浓度为0.4 ～1.0%。 4.根据权利要求1所述的硒化阳春砂仁多糖， 其特征在于： 所述亚硒酸钠的加入量为所 述阳春砂仁粗多糖A VP质量的1～3倍。 5.根据权利要求2所述的硒化阳春砂仁多糖， 其特征在于： 通过在纯化多糖液中加入无 水乙醇使 多糖沉淀 。 6.根据权利要求1所述的硒化阳春砂仁多糖， 其特征在于： 步骤S2)中， 反应的时间为6 ～24 h。 7.一种组合物， 其特 征在于： 含有权利要求1～6任一项所述的硒化阳春砂仁多糖。 8.硒化阳春砂仁多糖在制备抗幽门螺杆菌组合物中的应用， 所述硒化阳春砂仁多糖如 权利要求1～6任一项所述。 9.硒化阳春砂仁多糖在制备抗乳腺癌组合物或乳腺癌辅助治疗组合物中的应用， 所述 硒化阳春砂仁多糖如权利要求1～6任一项所述。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113667032 B 2硒化阳春砂仁多糖及其制备方 法和应用 技术领域 [0001]本发明涉及多糖领域， 具体涉及硒化阳春砂仁多糖及其制备 方法和应用。 背景技术 [0002]多糖是由至少10个单糖通过糖苷键连接而成的高分子化合物， 在生命活动中起着 重要的作用。 多糖具有广泛的生物活性， 如抗氧化、 抗肿瘤和免疫调节等活性， 由于具有活 性好、 毒性低的特点， 成为国内外研究的重点。 多糖的活性直接受结构的影响， 有许多因素 会使多糖活性较差达不到应用要求或没有活性。 目前国内外普遍采用化学修饰的方法增强 多糖的生物活性， 在这些 方法中， 硒化 修饰较为常用。 [0003]硒 （Se） 是人体内必需的微量元素， 人体无法合成， 只能通过食物获取。 硒在人体内 具有抗肿瘤、 抗氧化和免疫调节等作用。 无机硒在人体内具有停留时间短、 生物利用率低、 毒性大等特点。 如何有效地补充硒， 是一种有 待解决的问题。 [0004]阳春砂仁作为具有较高经济价值和药用价值的药材， 关于阳春砂仁硒化多糖应该 有深入的研究， 从而提高阳春砂仁多糖的应用价值。 本实验室在前期对阳春砂仁多糖进行 了分离纯化、 结构解析和活性研究 ， 关于阳春砂仁硒化多糖的研究未见报道。 CN112920287A、 CN112794925A公开了阳春砂粗多糖AVP的制备方法， 同时进一步 分离纯化得 到了阳春砂多糖AVPG ‑1和阳春砂多糖AVPG ‑2。 阳春砂多糖AVPG ‑1在50‑200 μg/mL浓度范围 内， 可显著促进巨噬细胞RAW  264.7产生NO， 提高巨噬细胞 RAW 264.7的细胞活力。 阳春砂多 糖AVPG‑2， 在100‑800 μg/mL浓度范围内， 可显著促进巨噬细胞RAW  264.7产生NO， 分泌细胞 因子IL‑6和TNF‑α， 提高巨噬细胞RAW  264.7的细胞活力和吞噬能力， 有望用于制备免疫调 节保健品或药物。 这种多糖的功能较为单一。 发明内容 [0005]本发明的目的在于克服现有技术的至少一个不足， 提供硒化阳春砂仁多糖及 其制 备方法和应用。 [0006]本发明所采取的技 术方案是： [0007]通过化学合成法将无机硒与多糖结合起来， 不仅可以克服以上缺点， 而且可以发 挥出“1+1 > 2”的效果， 提高二 者的生物活性， 且更有利于 机体吸收利用。 [0008]本发明的第一个方面， 提供： [0009]硒化阳春砂仁多糖， 由阳春砂仁粗多糖A VP经硒化 修饰得到 。 [0010]在一些实例中， 阳春砂仁粗多糖AVP通过将阳春砂粉末脱脂后水提， 之后进一步去 除其中的蛋白得到， 主 要含有阳春砂多糖A VPG‑1和阳春砂多糖A VPG‑2。 [0011]在一些实例中， 硒化阳春砂仁多糖的制备 方法包括： [0012]S1)取阳春砂仁粗多糖AVP， 加入浓度不超过1%的硝酸溶液， 充 分搅拌反应， 得反应 液A； [0013]S2)在反应液A中加入BaCl2和亚硒酸钠， 5 0～90℃充分反应， 得反应液B；说　明　书 1/6 页 3 CN 113667032 B 3