(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111141176.5 (22)申请日 2021.09.27 (71)申请人 南通市肿瘤医院 地址 226361 江苏省南 通市通州区平潮镇 通扬北路3 0号 (72)发明人 杨影　王高仁　魏晟　沈爱国　 (74)专利代理 机构 南京申云知识产权代理事务 所(普通合伙) 32274 代理人 邱兴天 (51)Int.Cl. C12N 15/113(2010.01) A61K 31/713(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 靶向EHD2基因的siRNA及其应用 (57)摘要 本发明公开了靶向EHD2 基因的siRNA及其应 用， 属于生物医药技术领域。 本明针对EHD2设计 特异性siRNA能够有效靶向阻断EHD2在细胞中的 表达， 通过高效抑制EHD2基表达， 可以促进非小 细胞肺癌细胞的增殖， 迁移， 侵袭以及对肺癌细 胞上皮‑间质转化进程的通路激活的作用。 因此， 本发明提供的靶向EHD2 基因的siRNA分子 可以用 于建立肺癌细胞生长相关模型， 有助于阐明EHD2 基因及其靶基因作用， 有助于阐明EHD2转录因子 在恶性肿瘤中的发展规律， 为 从分子水平研究肺 癌的发病机制提供帮助。 权利要求书1页 说明书6页 序列表2页 附图4页 CN 114075563 A 2022.02.22 CN 114075563 A 1.一种靶向E HD2基因的siRNA分子， 其特 征在于， 是核酸序列如下的双链RNA分子： 正义序列： 5 ′ ‑UCCGCAAACUCAACCCUUUdTdT‑3′， 反义序列： 5 ′ ‑AAAGGGUUGAGUUUGCGGAdTdT‑3′； 或 正义序列： 5 ′ ‑GGAAGGAGAACAAGAAGAAdTdT‑3′， 反义序列： 5 ′ ‑UUCUUCUUGUUCUCCUUCCdTdT‑3′； 或 正义序列： 5 ′ ‑CCAAAUACGACGAGAUCU UdTdT‑3′， 反义序列： 5 ′ ‑AAGAUCUCGUCGUAU UUGGdTdT‑3′。 2.权利要求1所述的靶向E HD2的siRNA分子在 如下(a)‑(d)至少一种中的应用： (a)促进肺癌细胞增殖， 或者制备用于促进肺癌细胞增殖的产品； (b)促进肺癌细胞迁移， 或者制备用于促进肺癌细胞迁移的产品； (c)促进肺癌细胞侵 袭， 或者制备用于促进肺癌细胞侵 袭的产品； (d)激活肺癌细胞中E MT通路， 或者制备用于 激活肺癌细胞中E MT通路的产品。 3.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于： 所述用于促进肺癌细胞增殖的产品为增殖 能力增强的肺癌细胞模型， 或者是用于制备增殖能力增强的肺癌细胞模型的物质。 4.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于： 所述用于促进肺癌细胞迁移的产品为迁移 能力增强的肺癌细胞模型， 或者是用于制备迁移能力增强的肺癌细胞模型的物质。 5.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于： 所述用于促进肺癌细胞增殖的产品为增殖 能力增强的肺癌细胞模型， 或者是用于制备增殖能力增强的肺癌细胞模型的物质。 6.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于： 所述用于激活肺癌细胞中EMT通路的产品 为肺癌细胞中EMT通路激活的肺癌细胞模 型， 或者是用于制备肺癌细胞中EMT通路激活的模 型的物质。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114075563 A 2靶向EHD2基因的siRNA及其应用 技术领域 [0001]本发明属于生物医药技术领域， 更具体地说， 涉及靶向EHD2基因的siRNA及其应 用。 背景技术 [0002]肺癌是全球癌症相关死亡的主要原因。 非小细胞肺癌是最主要的肺癌类型， 约占 总病例数的8 5％。 近年来， 通过手术、 化疗、 放疗、 靶向治疗及免疫治疗大大改善了肺癌患者 的预后。 但由于治疗后易发生复发、 转移和耐药性， 肺癌患者的5年生存率不超过20％。 放射 治疗作为非小细胞肺癌最重要的非手术治疗， 然而疗效仍然受到多种因素 的影响， 如肿瘤 上皮细胞 ‑间充质转化、 肿瘤的固有辐射抵抗力、 肿瘤细胞的异质性、 肿瘤微环境和免疫反 应。 因此， 探索新的关键靶基因和治疗靶点， 改善放疗疗效， 对于治疗非小细胞肺癌来说尤 为重要。 [0003]EHD2(EH‑domian containing  protein2)作为EHD家族的重要成员， 是一种C端含 有EH域的膜转运调控蛋白， 具有信号转导、 调控膜蛋白和膜受体内吞的作用。 近年来的报道 表明， EHD2与多种癌症相关。 在肝癌中EHD2与E ‑cadherin存在相互作用， 当受机械应力刺激 或辐射时， 小窝解体， 形成E ‑cadherin囊泡入 胞至溶酶体降解 或循环到质膜， 募 集EHD2将其 稳定在质膜。 E ‑cadherin丢失是体内EMT的一个关键事件， 在肺癌、 乳腺癌、 和卵巢癌中， E ‑ cadherin的下调导 致细胞间粘附减少， 是肿瘤进 展的一个重要特 征。 发明内容 [0004]针对现有技术存在的上述问题， 本发明所要解决的技术问题在于提供一种靶向 EHD2基因的siRNA。 本发明所要解决的另一技术问题在于提供前述靶向EHD2基因的siRNA在 用于建立肺癌生长相关模型中的应用。 [0005]为了解决上述 技术问题， 本发明所采用的技 术方案如下： [0006]一种靶向E HD2基因的siRNA分子， 是核酸序列如下的双链RNA分子： [0007]正义序列： 5 ′ ‑UCCGCAAACUCAACCCUUUdTdT‑3′， [0008]反义序列： 5 ′ ‑AAAGGGUUGAGUUUGCGGAdTdT‑3′； [0009]或 [0010]正义序列： 5 ′ ‑GGAAGGAGAACAAGAAGAAdTdT‑3′， [0011]反义序列： 5 ′ ‑UUCUUCUUGUUCUCCUUCCdTdT‑3′； [0012]或 [0013]正义序列： 5 ′ ‑CCAAAUACGACGAGAUCU UdTdT‑3′， [0014]反义序列： 5 ′ ‑AAGAUCUCGUCGUAU UUGGdTdT‑3′。 [0015]所述的靶向E HD2的siRNA分子在 如下(a)‑(d)至少一种中的应用： [0016](a)促进肺癌细胞增殖， 或者制备用于促进肺癌细胞增殖的产品； [0017](b)促进肺癌细胞迁移， 或者制备用于促进肺癌细胞迁移的产品；说　明　书 1/6 页 3 CN 114075563 A 3