ICS 65.020.20 B 05 DB64 宁夏回族自治区地方标准 DB 64/ T1623—2019 水稻发芽期和苗期抗旱性形态指标鉴定方 法 Identification Methods of Drought Resisting in Rice during Germination and Seedling with Morphological Indexes 地方标准信息服务平台 2019-02-12发布 2019-05-12实施 宁夏回族自治区市场监督管理厅 发布 地方标准信息服务平台 DB64/ T1623—2019 前言 本标准按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》规定编写。 本标准由宁夏农林科学院和宁夏农林科学院农业生物技术研究中心提出。 本标准由宁夏回族自治区农业农村厅归口。 本标准起草单位：宁夏农林科学院、宁夏农林科学院农业生物技术研究中心。 本标准主要起草人：刘炜、吕学莲、白海波、惠建、吴秀玲、路洁、赵丹青、马静、李树华。 地方标准信息服务平台 I 地方标准信息服务平台 DB64/T1623——2019 水稻发芽期和苗期抗旱性形态指标鉴定方法 1范围 本标准规定了水稻（OryzasativaL.）试验样品及发芽期和苗期抗旱性鉴定的方法。 本标准适用于水稻发芽期和苗期的抗旱性鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T3543.4-1995农作物种子检验规程发芽试验 GB4404.1-2008粮食作物种子一禾谷类 GB/T6682-2008分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 抗旱形态指标 作物在受到旱胁迫时，引起植株体内细胞在结构特征和生理生化活动过程中产生一系列适应性改 变后，都通过作物的形态特征所表现出来，因而部分形态特征能够比较直观的反映出不同品种间的抗 旱性差异，可以作为作物抗旱性鉴定的指标。 地方标 3. 2 旱胁迫 信息服务平台 到伤害。 3. 3 积温 作物生长发育阶段内逐日平均气温的总和。是衡量作物生长发育过程热量条件的一种标 4试剂 除非另有说明，本标准所用试剂均为分析纯，所用水符合GB/T6682中规定的一级水的要求。95% 酒精、次氯酸钠溶液（NaC10有效氯含量为10%）、聚乙二醇6000（PEG-6000）、四水硝酸钙（Ca（N03)2 1 DB64/T1623—2019 ·4H2O）、硝酸钾（KNO3）、硝酸铵（NHANOs）、磷酸二氢钾（KH2PO4）、硫酸镁（MgSO4·7H2O）、七水 硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）、乙二胺四乙酸二钠（EDTA·Na2）、碘化钾（KI）、硼酸（H3BO3）、硫酸锰（MnSO4 ·4H20）、硫酸锌（ZnSO4·7H20）、钼酸钠（Na2Mo04·2H20）、硫酸铜（CuS04·5H20）、氯化钻（CoC12·6H20）、 浓盐酸（HC1）。 5仪器及用具 干燥箱、分析天平、培养血（直径9cm和直径15cm）、滤纸、塑料箱、pH试纸、加氧泵（80W）、 种子萌发袋（购自康颂博（北京）生物科技有限公司，型号是CYG-38LB。）、镊子、育苗基质（泥炭， 珍珠岩，园艺蛭石体积比为1：1：1）、育苗盘（54cm×28cm×5cm，32穴）。 6试验样品 试验样品为水稻种子，其质量应符合GB4404.1一2008中对水稻种子的要求。 7发芽期抗旱性鉴定 7.1种子消毒 取不同品种（材料）的水稻种子各600粒，置于50℃恒温箱处理48h打破休眠后，放入100ml 三角瓶中，先用自来水冲洗3次，用30ml70%酒精浸泡5min后倒掉酒精，再用蒸馏水将种子冲洗2 遍后，用30ml3%NaC10浸泡消毒30min，蒸馏水冲洗3遍，备用。 7.2发芽期旱胁迫处理 将消毒后的各品种（材料）种子放入直径9cm铺有双层滤纸的培养皿中，每个培养皿100粒种子， 均匀摆放，向培养血中加入10m1-0.50MPaPEG-6000溶液进行胁迫处理，盖好血盖，以不含PEG-6000 的蒸馏水作为对照，各3次重复。将摆好种子的培养血放入30℃人工气候箱中黑暗萌发，每天涮洗并 更换相应的溶液以保持胁迫液浓度恒定。 7.3测定指标 萌发7d后，将培养皿取出，以水稻芽长达到2mm、根长达到4mm为发芽标准，调查种子发芽率， 并计算相对旱损率。按以下公式进行计算： 你作 ×100 供试种子数 =×100 (2) 对照发芽率 注：按照附录B.1的抗旱级别进行发芽期抗旱性评价。根据相对旱损率范围，将抗旱性分为五级：极强、强、中、弱和 极弱。 8苗期抗旱性鉴定 8.1种子萌发 2 DB64/T1623—2019 取不同品种（材料）水稻种子各100粒，置于50℃恒温箱处理48h打破休眠后，对种子进行表 面消毒，消毒方法同7.1。将消毒后的种子转移至直径15cm底部铺有双层滤纸的培养血中，加入15ml 蒸馏水，盖好皿盖，在30℃人工气候箱中黑暗萌发，期间每天更换一次蒸馏水。 8.2播种及幼苗培养 8.2.1种子播种 幼苗培养采用种子萌发袋法。取8.1中萌发2天露白的种子，将种子胚向下、间隔均匀地播种在 萌发袋发芽槽的发芽孔上，每个萌发袋播10粒种子，每个品种（材料）共播种6个萌发袋，将各萌发 袋按品种（材料）在外层塑料纸上编号。 8.2.2旱胁迫处理 旱胁迫设1个处理和1个对照，处理用-0.50MPaPEG-6000的溶液进行处理，对照用不含PEG-6000 的蒸馏水处理。具体方法是用10mL移液器分2次分别吸取20mL-0.50MPaPEG-6000的溶液和不 含PEG-6000的蒸馏水，分别加入到处理和对照萌发袋的萌发槽中，不同品种（材料）各3次重复， 即3个萌发袋。每3d将萌发袋颠倒30min后，将其中的液体沥干，更换20mL相应的胁迫液。 8.2.3幼苗培养 将加好处理液的萌发袋用夹子固定于培养架上，置于28℃～30℃人工气候箱或培养室培养，每天 光照12h，光照强度1200Lux。培养10d后，待幼苗长至3cm～4cm，按8.2.2中的方法将萌发袋中的 溶液沥干后，重新加入20mL含-0.50MPaPEG-6000的1×改良霍格兰氏营养液和不含PEG-6000的1X 改良霍格兰氏营养液继续培养，每3d更换一次相应的营养液。培养18d后，待幼苗长至3叶期时，进 行苗高和根系性状测定。 8.3苗高及根系性状测定 8.3.1苗高测定 将处理和对照幼苗从萌发袋中取出，用直尺量取处理组和对照组苗高，即从水稻幼苗茎基部种壳 的位置到最长叶片尖部的高度。按8.5中公式（4）计算隶属函数值。 8.3.2根长测定 将8.3.1中的幼苗，用直尺量取处理组和对照组最大根长。按8.5中公式（4）计算隶属函数值。 8.3.3地上部和地下部干重测定 将8.3.1和8.3.2中已测定过苗高和根长的地上部分和地下部分，于干燥箱中105℃杀青10min后， 72℃烘干48h至恒重，用电子天平称取每株苗地上部和地下部的生物量干重。按8.5中公式（4）计算 服务平台 隶属函数值。 8.4芽鞘长度测定 8.4.1苗床准备 育苗基质按基质质量（kg）：溶液体积（L）=1:1.2的比例，将基质与-0.50MPaPEG-6000的胁迫 kg基质混合物。 3