ICS 65.150 B 51 Sc 中华人民共和国水产行业标准 SC 2080—2007 毛蚶 Ark shell 行业标准信息服务平台 2007-12-18 发布 2008-03-01实施 ，中华人民共和国农业部 发布 SC 2080—2007 前言 本标准的第4章、第6章为强制性的，其余为推荐性的。 本标准的附录 A为规范性附录,附录 B为资料性附录。 本标准由中华人民共和国农业部渔业局提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会海水养殖分技术委员会归口。 本标准起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所、中国海洋大学。 本标准主要起草人：张岩、高天翔、陈四清、刘曼红、于东祥。 行业标准信息服务平台 SC 2080—2007 毛蚶 1 范围 本标准给出了毛蚶的主要形态构造特征、生长与繁殖、遗传学特性、生化遗传学特征及检测方法。 本标准适用于毛蚶的种质鉴定与检测。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分：抽样方法 GB/T18654.12养殖鱼类种质检验第12部分：染色体组型分析 3名称与分类 3.1学名 毛蚶 Scapharrca subcrenata (Lischke, 1869) 3.2分类地位 双壳纲（Bivalvia）、蚶目（Arcoida）、蚶科（Arcidae）、毛蚶属（Scapharca）。 4主要形态特征 4.1外形 贝壳呈长卵圆形，壳质坚厚，壳外面隆起，有棕褐色茸毛，通常两壳大小不等，右壳稍小。背侧两端 略显棱角，腹缘前端圆，后端稍延长。壳顶突出，向内卷曲，位置偏向前方，两壳顶距离不很远。壳面有 放射肋31条～39条，主要集中在34条～36条。无粒状突起，肋上有方形小节结，状似瓦。生长纹在 腹侧极明显。壳面白色，被有褐色绒毛状壳皮。壳内白色，壳缘具齿。铰合处很窄，呈直线形，齿 细密。 毛蚶的外部形态见图1。 图1毛蚶的外部形态 SC 2080—2007 4.2可数性状 放射肋：31条39条，多数为34条～36条。 4.3可量性状 毛蚶的壳长、壳高、壳宽之间的比例因不同种群而不同，具体数据见表1。 表1不同种群毛蚶的壳长、壳高、壳宽之间的比例关系 壳长/壳宽 壳高/壳宽 壳长/壳高 项目 均值 标准差 样本数 均值 标准差 样本数 标准差 样本数 均值 1.270 532 1.549 0. 093 537 1.218 0.069 531 0.048 0.059 1. 575 0. 091 497 1.168 象山港 1.348 497 0.062 497 5 生长与繁殖 5.1年龄与生长 5.1.1年龄与壳长、壳高和体重的关系 渤海湾毛蚶和象山港毛蚶年龄与壳长、壳高和体重的关系见表2。 表2毛蚶年龄与壳长、壳高和体重的关系 年龄 壳长 体重 壳高 产地 软体部干重/壳重 (龄) (mm) (uu) (8) 15.980 12.352 1.178 1 22.244 6.548 0. 082 918 2 28. 282 渤海湾 36.465 28.824 14.053 0.088 260 3 34.255 23.417 0.104 486 4 43.219 14.134 10.755 0.859 1 2 21.189 15.872 2.903 0.064 592 象山港 22.703 3 8.842 0. 071 989 30.689 33.676 0. 078 424 4 24.850 11.690 5.1.2生长方程 5.2繁殖 5.2.1性成熟年龄 毛蚶为雌雄异体，2足龄即可达性成熟。 5.2.2繁殖季节 毛蚶的繁殖季节为7月9月，8月为盛期，水温大约25℃时开始产卵，27℃时为繁殖盛期。 行业标准信息服务平台 6 细胞遗传学特征 毛蚶体细胞染色体数：2n=38。 7生化遗传学特征 7.1同工酶图谱 毛苹果酸酶(ME)同工酶的电泳图谱见图2。 2 SC20802007 图2毛蚶苹果酸酶（ME）同工酶电泳图谱 7.2群体变异范围 青岛沿岸毛蚶群体多态位点比例为51.85%，杂合度观察值（H。）为0.029~0.612，平均0.133 ±0.036；平均有效等位基因数（N）为1.030～2.577，平均为1.381士0.345。 8检测方法 8.1抽样方法 按GB/T18654.2的规定执行，每一群体样品数量在30个以上。 8.2染色体和核型检测 按8μg/g（体重）向毛蚶体内注射PHA，16h~24h后，再按照2μg/g~4μg/g注射秋水仙素，作用 4h~6h，取鳃组织匀浆，室温下用9.7%的KCl低渗40min~60min，甲醇：冰醋酸（3：1）固定3次，空 气干燥法制片，染色体玻片用10%Giemsa染色，显微镜下统计染色体数目。 8.3生化遗传学特性分析 8.3.1样品制备 活体或低温样品带回实验室。取肌肉和肝脏，密封放入超低温冰箱（一76℃）或液氮罐中贮存。将 液（pH7.0）（配制方法见附录A），冰水浴中匀浆后，倒入1.5mL离心管内，在0℃~4℃冷冻离心机中 15000r/min，离心15min，离心后取上清液作为电泳样品。 8.3.2电泳分析 采用淀粉凝胶电泳方法，凝胶浓度为12%，电泳缓冲系统为TC，pH7.0（配制方法见附录A），恒流 （电场强度大小为8V/cm）电泳5h~6h。电泳过程在4℃冰箱中进行。凝胶厚度为6mm，电泳后切成 4片～5片，分别进行各种酶的染色，染色过程在37℃恒温箱中进行，染色液配方见附录A。 8.3.3结果计算 群体遗传学特征的数据是，对青岛沿岸样品的肝胰腺组织中的碱性蛋白酶（AK）、酯酶（EST）、6-磷 酸葡萄糖异构酶（GPI）、HK、异柠檬酸脱氢酶（IDH）、乳酸脱氢酶（LDH）、苹果酸酶（ME）、苹果酸脱氢 酶（MDH）、磷酸葡萄糖变位酶（PGM）磷酸葡萄糖脱氢酶（PGD）、山梨醇脱氢酶（SDH）和超氧化物歧 化酶（SOD）等12种同工酶的检测结果，样品数量44~124，多态位点比例（P）、平均杂合度观察值 （H。）、平均有效等位基因数（N）分别按公式（1）公式（2）和公式（3）计算： P=N,/nX100% （1) 式中： P多态位点比例； N 多态位点数； 检测位点总数。 H.=(Z H)/n (2) 3 SC 2080—2007 式中: Ho 平均杂合度观察值； H1 多态位点杂合度观察值； 观察位点总和。 n N- Z (1-Ho)/n (3) 式中： Ne 平均有效等位基因数； Ho 平均杂合度观察值； 观察位点总和。 n 9 判定规则 样品。 行业标准信息服务平台 SC 2080—2007 附录A (规范性附录) 各种缓冲液、染色液配方 A. 1 TC缓冲液 三羟甲基氨基甲烷3.028g，用柠檬酸调整pH至7.0,蒸馏水定容至1L。 A.20. 1 mol/L磷酸缓冲液(pH 7.0)的配置 1 mol/L K,HPO4 61. 5mL,1 mol/L KHzPO 38. 5 mL,用水稀释至 1 000 mL。 A.3NADP 基本保存液 NADP(N- 0505):300 mg;MTT(M- 2128):300 mg;纯水:1 000 mL。 A. 4 PMS 基本保存液 PMS(P-9625):150 mg;纯水:10 mL。 A.5同工酶的染色液配制方法 同工酶染色液配制方法见表A.1。 表A.1 同工酶的染色液配制方 同工酶 英文及缩写 药品 浓度 剂量 Tris-HCl, pH 8. 5 0. 2 mol/ L 25 mL 250 mg Malic acid malic enzyme 苹果酸酶 MgCl 1 mol/ L 0.5mL ME NADP基本保存液 25 mL PMS基本保存液 3 滴~5 滴 行业标准信息服务平台 5