ICS 65.020.20 CCS B 05 山 37 东 省 地 方 标 准 DB37/T 4252—2020 灵芝菌种质量要求 Quality requirements of Ganoderma lingzhi spawn 2020-12-04 发布 2021-01-01 实施 山东省市场监督管理局 发 布 DB37/T 4252—2020 目 次 前言 ................................................................................. II 1 范围 ............................................................................... 1 2 规范性引用文件 ..................................................................... 1 3 术语和定义 ......................................................................... 1 4 质量指标 ........................................................................... 1 4.1 固体菌种 ....................................................................... 4.1.1 母种质量 ................................................................... 4.1.2 原种质量 ................................................................... 4.1.3 栽培种质量 ................................................................. 4.2 液体菌种 ....................................................................... 4.2.1 摇瓶液体菌种质量 ........................................................... 4.2.2 发酵罐液体菌种质量 ......................................................... 1 1 2 3 4 4 5 5 检验规则 ........................................................................... 6 6 留样 ............................................................................... 6 附录 A（规范性） 母种栽培性状检验方法和检验项目 ....................................... 7 I DB37/T 4252—2020 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由山东省农业农村厅提出并组织实施。 本文件由山东省农业标准化技术委员会归口。 本文件起草单位： 泰安市农业科学研究院、山东省农业技术推广总站、山东三秀生物科技有限公司。 本文件主要起草人：王庆武、高霞、丛倩倩、赵淑芳、崔晓、孙振福、唐丽娜、马化彬、李秀梅、 司元明、兰玉菲、张燕、安秀荣、于清伟、曹子英。 II DB37/T 4252—2020 灵芝菌种质量要求 1 范围 本文件规定了灵芝菌种质量要求的术语和定义、质量指标、检验规则、留样等技术要求。 本文件适用于灵芝菌种质量要求。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 150.1 压力容器 第1部分：通用要求 GB/T 12728 食用菌术语 NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程 NY/T 1742 食用菌菌种通用技术要求 3 术语和定义 GB/T 12728、NY/T 528界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 液体菌种 liquid spawn 用液体培养基，在发酵罐中，通过深层培养技术生产的液体形态的食用菌菌种。 3.2 终止 pH terminal pH value of medium 液体菌种达到放罐指标时的培养基pH。 4 质量指标 4.1 固体菌种 4.1.1 母种质量 4.1.1.1 容器 容器及封口物应符合NY/T 528的规定。 4.1.1.2 感官要求 母种感官要求应符合表1的规定。 表1 母种感官要求 1 DB37/T 4252—2020 项目 检测方法 要求 容器 肉眼观察 完整、无损、洁净 试管塞 肉眼观察 棉塞或硅胶塞，应干燥、洁净、松紧适度，能透气和滤菌 培养基灌入量 肉眼观察 试管总容量的 1/5～1/4 斜面长度 肉眼观察、测量 斜面顶端距试管塞底部距离 40 mm～50 mm 接种块大小 肉眼观察、测量 边长 3 mm～5 mm，厚 2.5 mm～3 mm 菌丝生长量 长满斜面 菌丝体特征 整齐浓密、丝状或绒毛状，白色 菌丝体表面 菌种外观 均匀、平整、无角变 肉眼观察 菌落边缘 整齐 菌丝分泌物 无 杂菌菌落 无 斜面背面外观 肉眼观察 培养基贴壁、不干缩，颜色均匀、无暗斑、无明显色素 气味 鼻嗅 有灵芝菌种特有的香味，无酸、臭、霉等异味 子实体原基 肉眼观察 无 肉眼观察，必要时 纯度 5×放大镜观察 菌丝显微形态 菌种微观 纯培养物，无虫（螨）体等生物 粗壮、丰满、均匀 显微镜 锁状联合 有 4.1.1.3 菌丝长速 采用PDA培养基，接种后26 ℃～28 ℃避光培养，48 h内菌丝萌发定植，8 d～10 d菌丝长满18 mm×180 mm试管斜面。 4.1.1.4 母种栽培性状检验 在棉籽壳68 %、阔叶木屑20 %、麦麸10 %、石膏1 %、石灰1 %、pH 6.0～6.5，含水量55 %～60 %的培 养基上，应符合附录A的方法，确证母种栽培性状合格后，方可生产原种和栽培种。 4.1.1.5 贮存要求 常温下贮存时间不超过7 d，4 ℃～6 ℃下贮存时间不超过90 d。 4.1.2 原种质量 4.1.2.1 容器 容器应符合NY/T 528的规定。菌种瓶封口应使用透气和滤菌的棉塞或无棉盖体，菌种袋封口应使用 套环或扎口。 4.1.2.2 感官要求 2 DB37/T 4252—2020 原种感官要求应符合表2的规定。 表2 原种感官要求 项目 检测方法 要求 容器 肉眼观察 完整、无损、洁净 封口物 肉眼观察 干燥、洁净、松紧适度，能透气和滤菌 培养基上表面距瓶（袋）口的距离 肉眼观察、测量 （50±5） mm 接种量 肉眼观察、测量 每瓶（袋）接 1.5 cm～2 cm 的母种一块 菌丝生长量 长满容器 菌丝体特征 洁白浓密、生长旺健 培养物 紧贴瓶（袋）壁，无干缩，无菌皮 菌种 培养物表面菌丝体 均匀一致，无角变，无高温抑制线 外观 培养物表面分泌物 无，允许有少量无色或浅黄色透明水珠 杂菌菌落 无 拮抗现象 无 子实体原基 无 肉眼观察 气味 纯度 菌种 菌丝显微形态 微观 锁状联合 鼻嗅 有灵芝菌种特有的清香味，无酸、臭、霉等异味 肉眼观察，必要时 5×放大镜 观察 纯培养物，无虫（螨）体等生物 粗壮、丰满、均匀 显微镜 有 4.1.2.3 菌丝长速 在棉籽壳47 %、阔叶木屑40 %、麦麸10 %、葡萄糖1 %、石膏1 %、石灰1 %、pH 6.0～6.5，含水量55 %～ 62 %的培养基上，接种后，26 ℃～28 ℃，空气相对湿度50 %～70 %条件下，避光培养，菌丝应在35 d～ 37 d长满750 mL菌种培养瓶。 4.1.2.4 贮存要求 在清洁、通风、干燥（空气相对湿度50 %～70 %）、避光的室内，常温下贮存时间不超过10 d，4 ℃～ 6 ℃下贮存时间不超过30 d。 4.1.3 栽培种质量 4.1.3.1 容器 容器应符合NY/T 528的规定，容器封口应符合4.1.2.1规定。 4.1.3.2 感官要求 栽培种感官要求应符合表3的规定。 3 DB37/T 4252—2020 表3 栽培种感官要求 项目 检测方法 要求 容器 肉眼观察 完整、无损、洁净 封口物 肉眼观察 干燥、洁净、松紧适度，能透气和滤菌 培养基上表面距瓶（袋）口的距离 肉眼观察、测量 （50±5） mm 接种量 肉眼观察、称量 12 g～15 g/瓶（袋） 菌丝生长量 长满容器 菌丝体特征 洁白浓密、生长旺健、饱满 培养物 紧贴（瓶）袋壁，无干缩，无菌皮 不同部位菌丝体 菌种外观 生长均匀，色泽一致，无角变，无高温抑制线 肉眼观察 培养物表面分泌物 无，允许有少量无色或浅黄色透明水珠 杂菌菌落 无 拮抗现象 无 子实体原基 无 气味 鼻嗅 肉眼观察，必要时 5×放 纯度 大镜观察 菌丝显微形态 菌种微观 有灵芝菌种特有的清香味，无酸、臭、霉等异味 纯培养物，无虫（螨）体等生物 粗壮、丰满、均匀 肉眼观察 锁状联合 有 4.1.3.3 菌丝长速 在棉籽壳48 %、阔叶木屑40 %、麦麸10 %、石膏1 %、石灰1 %、pH 6.0～6.5、含水量55 %～62 %的培 养基上，接种后26 ℃～28 ℃避光培养，空气相对湿度50 %～70 %，菌丝应在35 d～40 d长满17 cm×35 cm 菌种袋。 4.1.3.4 贮存要求 在清洁、通风、干燥（空气相对湿度50 %～70 %）、避光的室内，常温下贮存时间不超过15 d，4 ℃～ 6 ℃下贮存时间不超过45 d。 4.2 液体菌种 4.2.1 摇瓶液体菌种质量 4.2.1.1 容器