(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211027188.X (22)申请日 2022.08.25 (71)申请人 威海市世代海 洋生物科技股份有限 公司 地址 264319 山 东省威海市荣成市成山裕 兴路128号 (72)发明人 李明潭　曲元凯　 (74)专利代理 机构 北京鑫瑞森知识产权代理有 限公司 1 1961 专利代理师 代芳 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/18(2006.01) C12N 1/38(2006.01) A23K 10/18(2016.01)C12R 1/10(2006.01) C12R 1/25(2006.01) C12R 1/865(2006.01) (54)发明名称 一种以海带酶解粉为主要基质的多菌种联 合发酵生产植物乳杆菌的方法 (57)摘要 本发明公开了一种以海带酶解粉为主要基 质的多菌种联合发酵生产植物乳杆菌的方法， 属 于微生物发酵技术领域。 本发明利用酿酒酵母、 地衣芽孢杆菌和植物乳杆菌进行联合发酵， 可生 产高活性饲料用微生态制剂产品。 在液态培养基 中， 先通过酵母菌的生长消耗掉其中的氧气， 创 造厌氧环境， 然后通过地衣芽孢杆菌生长分泌蛋 白酶、 淀粉酶等， 水解培养基中养分可供植物乳 杆菌快速生长。 三种菌的联合培养充分利用了海 带酶解物 等培养基中的各种营养成分， 将其转化 成高益生活性的植物乳杆菌 菌体。 权利要求书1页 说明书5页 CN 115161248 A 2022.10.11 CN 115161248 A 1.一种以海带酶解粉为主要基质的多菌种联合发酵生产植物乳杆菌的方法， 其特征在 于， 所述方法是以酿酒酵母、 地衣芽孢杆菌和植物乳杆菌作为发酵菌种， 在 含有海带酶解物 干粉的培 养基中进行发酵。 2.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 所述酿酒酵母、 地衣芽孢杆菌和植物乳杆 菌分别为 酿酒酵母BNC C192858、 地衣芽孢杆菌S DHY‑2101和植物乳杆菌BNC C 138404。 3.根据权利要求2所述的方法， 其特征在于， 所述酿酒酵母BNCC192858、 地衣芽孢杆菌 SDHY‑2101和植物乳杆菌BNC C 138404的种子液的体积比为1:2:2或2:2:2。 4.根据权利要求1 ‑3中任一项所述的方法， 其特征在于， 所述含有海带酶解物干粉的培 养基为： 海带酶解物干粉10％ ‑19wt％、 菜粕8wt％、 葡萄糖3wt％、 小麦麸皮8wt％、 玉米粉 5wt％、 余 量为水。 5.根据权利要求4所述的方法， 其特征在于， 所述发酵过程为恒温发酵， 温度为30℃， 发 酵时间为72h 。 6.根据权利要求4所述的方法， 其特征在于， 所述发酵过程分为两个阶段， 第一个阶段 为30℃培养24h， 第二个阶段为37℃继续培 养48h。 7.权利要求1 ‑3中任一项所述的方法在生产植物乳杆菌中的应用。 8.权利要求 4所述的方法在生产植物乳杆菌中的应用。 9.权利要求5或6所述的方法在生产植物乳杆菌中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115161248 A 2一种以海带酶解粉为主要基质的多菌种联合发酵生产植物乳 杆菌的方 法 技术领域 [0001]本发明属于微生物发酵技术领域， 尤其涉及一种以海带酶解粉为主要基质的多菌 种联合发酵生产植物乳杆菌的方法。 背景技术 [0002]海带(Laminariajaponica)是多年生大型食用藻类， 含有丰富的褐藻胶、 岩藻糖 胶、 褐藻淀粉等海带多糖， 并含有酸性聚糖类物质、 岩藻半乳多糖硫酸酯、 大叶藻素、 半乳糖 醛酸、 昆布氨酸、 牛磺酸、 双歧因子等多种活性成分。 据测定， 每100g海带中含8g蛋白质、 0.1g脂肪、 0.57mg胡萝卜素、 0.09mgVB、 0.36mgVB1、 1.6mg烟酸、 1.177mg钙、 1.50mg铁， 2.16mg磷， 还含有丰富的褐藻酸、 纤维素、 甘露醇以及多种 微量元素。 海带酶解干粉是通过 多种酶制剂将海带原 浆进行降解， 充分释放里面的活性成分， 然后喷雾干燥处理成干粉。 海 带酶解干粉里面含有多种氨基酸、 维生素、 多糖和微量元素， 非常适合作为微生物发酵培养 基使用。 利用微生物发酵， 将低值的海 带酶解粉转化为高活性微生态制剂产品， 可以大幅度 提高其附加值。 [0003]酿酒酵母(Saccharomyces  cerevisiae)， 又称面包酵母或者出芽酵母。 酿酒酵母 是与人类关系最广泛的一种酵母， 用于制作面包和馒头等食品及酿酒。 酿酒酵母的细胞为 球形或者卵形， 直径5 ‑10 μm。 其繁殖的方法为出芽生殖。 酿 酒酵母与同为真核生物的动物和 植物细胞具有很多相同的结构， 又容易培养， 酵母被用作研究真核生物的模式生物。 酿 酒酵 母被认为是最具潜力的大规模生产菌种。 [0004]地衣芽孢杆菌(Bacillus  licheniformis)是一种革兰氏染色阳性菌， 能够分泌蛋 白酶、 淀粉酶等多种酶， 酶分泌的最适 温度为37℃该细菌可调整菌群失调达到治疗目的， 可 促使机体产生 抗菌活性物质、 杀灭致病菌 。 能产生抗活性物质抑制致病菌的生长 繁殖。 [0005]植物乳杆菌(Lactobacillusplant arum)是一种在自然界广泛存在的革兰氏阳性 菌， 普遍分布在各类发酵食品中， 同时也是肠道内重要的益生微生物菌群之一。 由于植物乳 杆菌具有优良的耐受强酸、 胆盐、 高渗透压、 极端温度、 饥饿和氧化等胁迫的能力， 使 得其在 工业生产、 医疗保健及食品加工等领域被广泛应用。 发明内容 [0006]本发明的目的之一在于提供一种以海带酶解粉为主要基质的多菌种联合发酵生 产植物乳杆菌的方法， 所述方法是以酿酒酵母、 地衣芽孢杆菌和植物乳杆菌作为发酵菌种， 在含有海带酶解物干粉的培 养基中进行发酵。 [0007]优选地， 所述酿酒酵母、 地衣芽孢杆菌和植物乳杆菌分别为酿酒酵母BNCC 192858、 地衣芽孢杆菌S DHY‑2101和植物乳杆菌BNC C 138404。 [0008]更优选地， 所述酿酒酵母BNCC192858、 地衣芽孢杆菌SDHY ‑2101和植物乳杆菌 BNCC138404的种子液的体积比为1:2:2或2:2:2。说　明　书 1/5 页 3 CN 115161248 A 3