(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210656206.4 (22)申请日 2022.06.10 (71)申请人 中牛集团有限公司 地址 476200 河南省商丘市柘城县 谷水路 (72)发明人 夏皓帆　范恩源　范长华　徐胜林　 马兵　陈启峰　高文才　 (74)专利代理 机构 郑州云企轻舟专利代理事务 所(普通合伙) 41216 专利代理师 吴素华 (51)Int.Cl. C12N 9/20(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C12N 11/14(2006.01) C14C 11/00(2006.01) C12R 1/38(2006.01) (54)发明名称 一种生态皮革用生物酶制剂制备方法和应 用 (57)摘要 本发明提供一种生态皮革用生物酶制剂制 备方法和应用， 属于皮革加工技术领域， 该生物 酶制剂制备方法包括如下步骤： S1、 将培养液倒 入搅拌容器中， 然后加入， 放置于产脂肪酶的假 单胞菌， 进行混匀， 搅拌放置21 ‑24h， 得到混合液 A， 将混合液加入发酵培养 液中， 再次进行搅拌混 合， 得到混合液B， 待用； S2、 将混合液B放入离心 机内进行离心， 收集上清液， 得到脂肪酶溶液； S3、 将脂肪酶溶液然后滴加到氯化钙溶液中， 静 止2‑3h， 待形成有凝胶小球； 本方案中， 通过以培 养液为载体制备得到的脂肪酶， 纯度高、 质量好、 活性高、 渗透性强， 具有较高的催化活性功能， 能 够催化各类酯化、 转酯化反应， 能够更好地应用 于动物毛皮制备的皮革中。 权利要求书1页 说明书4页 附图2页 CN 114990091 A 2022.09.02 CN 114990091 A 1.一种生态皮革用生物酶制剂制备 方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： S1、 将培养液倒入搅拌容器 中， 然后加入， 放置于产脂肪酶的假单胞菌， 进行混匀， 搅拌 放置21‑24h， 得到混合液A， 将混合液加入发酵培养液中， 再次进行搅拌混合， 得到混合液B， 待用； S2、 将混合液B放入离心机内进行离心， 收集上清液， 得到 脂肪酶溶 液； S3、 将脂肪酶溶 液然后滴加到氯化钙溶 液中， 静止2 ‑3h， 待形成有凝胶小球； S4、 将步骤S3中的脂肪酶溶液再加入聚乙二醇溶液中， 使脂肪酶沉淀； 之后离心， 收集 沉淀； 将沉淀 透析后冻干 干燥， 即可 得到脂肪酶。 2.根据权利要求1所述的一种生态皮革用生物酶制 剂制备方法， 其特征在于， 所述步骤 S1中搅拌容器中的培 养液为20L。 3.根据权利要求1所述的一种生态皮革用生物酶制 剂制备方法， 其特征在于， 所述步骤 S1中混合液A和发酵培 养液的比例为10:1。 4.根据权利要求1所述的一种生态皮革用生物酶制 剂制备方法和应用， 其特征在于， 所 述步骤S1中发酵培 养液由酵母提取物、 蛋白胨、 NaCl、 植物油和水按任意比例混合制成。 5.根据权利要求1所述的一种生态皮革用生物酶制 剂制备方法， 其特征在于， 所述步骤 S2中采用高速冷冻离心机 。 6.根据权利要求5所述的一种生态皮革用生物酶制 剂制备方法， 其特征在于， 所述高速 冷冻离心机在4℃、 1080 0g的条件下离心15mi n。 7.根据权利要求5所述的一种生态皮革用生物酶制 剂制备方法， 其特征在于， 所述步骤 S4中在4℃、 10 000g的条件下离心10mi n。 8.一种生态皮革用生物酶制剂的应用， 其特 征在于， 包括如下步骤： 步骤一、 首 先将皮胚放置 于水中， 并加入脂肪酶， 进行浸泡； 步骤二、 将步骤一中所得回水皮胚进行摔鼓， 震荡打软后得震荡打软皮革， 使皮胚回到 平整状态； 步骤三、 然后对皮胚进行抛光、 喷涂涂料、 滚表面油以及烘干工序， 得到经脂肪酶脱脂 后的生态皮革。 9.根据权利要求8所述的一种生态皮革用生物酶制 剂的应用， 其特征在于， 所述步骤一 中皮胚、 脂肪酶和水的比例为1: （0.5 ‑1）‑1:5。 10.根据权利要求8所述的一种生态皮革用生物酶制剂的应用， 其特征在于， 所述步骤 一中皮胚放置 于带有脂肪酶的水中浸泡20 ‑24h。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114990091 A 2一种生态皮革用生物酶制剂制备方 法和应用 技术领域 [0001]本发明属于皮革加工技术领域， 具体涉及 一种生态皮革用生物酶制剂制备方法和 应用。 背景技术 [0002]生态皮革是各项生态指标符合生态标准要求的皮革产品。 生态指标包括皮革中的 六价铬含量、 甲醛含量、 致癌芳香胺含量和五氯苯酚含量； 随着生活水平的提高， 人们的健 康意识越来越强， 越来越注重绿色、 天然、 无污染的产品， 这是消费者考虑的主要因素， 因此 生态皮革将成为未来皮革 业发展的主流。 [0003]现有技术中， 由于皮革在制备生产时， 动物毛皮中含有一定的油脂成分， 这样就使 得制备的皮革质量变差， 甚至可能对使用者的身体机能造成危害。 发明内容 [0004]本发明的目的在于提供一种生态皮革用生物酶制剂制备方法和应用， 旨在解决现 有技术中的由于皮革在制备生产时， 动物毛皮中含有一定的油脂成分， 这样就使得制备 的 皮革质量变差， 甚至可能对使用者的身体机能造成危害的问题。 [0005]为实现上述目的， 本发明提供如下技 术方案： 一种生态皮革用生物酶制剂制备 方法， 包括如下步骤： S1、 将培养液倒入搅拌容器中， 然后加入， 放置于产脂肪酶的假单胞菌， 进行混匀， 搅拌放置21 ‑24h， 得到混合液A， 将混合液加入发酵培养液中， 再次进 行搅拌混合， 得到 混合 液B， 待用； S2、 将混合液B放入离心机内进行离心， 收集上清液， 得到 脂肪酶溶 液； S3、 将脂肪酶溶 液然后滴加到氯化钙溶 液中， 静止2 ‑3h， 待形成有凝胶小球； S4、 将步骤S3中的脂肪酶溶液再加入聚乙二醇溶液中， 使脂肪酶沉淀； 之后离心， 收集沉淀； 将沉淀 透析后冻干 干燥， 即可 得到脂肪酶。 [0006]作为本发明一种优选的方案， 所述 步骤S1中搅拌容器中的培 养液为20L。 [0007]作为本发明一种优选的方案， 所述 步骤S1中混合液A和发酵培 养液的比例为10:1。 [0008]作为本发明一种优选的方案， 所述步骤S1中发酵培养液由酵母提取物、 蛋白胨、 NaCl、 植物油和水按任意比例混合制成。 [0009]作为本发明一种优选的方案， 所述 步骤S2中采用高速冷冻离心机 。 [0010]作为本发明一种优选的方案， 所述高速冷冻离心机在4℃、 10800g的条件下离心 15min。 [0011]作为本发明一种优选的方案， 所述 步骤S4中在4℃、 10 000g的条件下离心10mi n。 [0012]一种生态皮革用生物酶制剂的应用， 包括如下步骤： 步骤一、 首 先将皮胚放置 于水中， 并加入脂肪酶， 进行浸泡； 步骤二、 将步骤一中所得回水皮胚进行摔鼓， 震荡打软后得震荡打软皮革， 使皮胚说　明　书 1/4 页 3 CN 114990091 A 3