ICS65.020.99 CCSB39 WSWXH 新疆维吾尔自治区微生物学会团体标准 T/WSWXH004—2022 光合细菌叶面肥生产技术规程 Technicalrulesforproductionofphotosyntheticbacteriafoliarfertilizer 2022-09-04发布 2022-09-06实施 新疆维吾尔自治区微生物学会  发布 全国团体标准信息平台 T/WSWXH004—2022 I目次 前言..................................................................................II 1范围................................................................................1 2规范性引用文件......................................................................1 3术语和定义..........................................................................1 光合细菌菌剂inoculantofphotosyntheticbacteria...............................1 原菌种theoriginalstrain......................................................1 一级菌种firstlevelstrain.....................................................1 二级菌种secondlevelstrain....................................................1 4生产用水和设施设备..................................................................1 生产用水........................................................................1 设施设备........................................................................1 5生产技术流程........................................................................2 生产流程........................................................................2 一级菌种质量....................................................................2 培养基..........................................................................2 二级菌种........................................................................2 光合细菌叶面肥调配..............................................................2 6生产记录............................................................................3 生产、加工过程记录..............................................................3 培养基采购使用记录..............................................................3 记录保存........................................................................3 附录A（资料性）光合细菌生产流程技术规程..............................................4 附录B（资料性）光合细菌培养基........................................................6 全国团体标准信息平台 T/WSWXH004—2022 II前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由新疆农业科学院微生物应用研究所提出。 本文件由新疆维吾尔自治区微生物学会归口。 本文件起草单位：新疆农业科学院微生物应用研究所，新疆农业科学院农作物品种资源研究所，新 疆大学生命科学与技术学院，石河子大学食品学院，新疆农业大学动物科学学院 本文件主要起草人：曾军、高雁、张龑、张志东、霍向东、孙建、王为兰、关波、胡友贞、陈开旭 全国团体标准信息平台 T/WSWXH004—2022 1光合细菌叶面肥生产技术规程 1范围 本文件规定了光合细菌叶面肥生产环境、设备、技术流程、质量检测及储存。 本文件适用于光合细菌叶面肥生产企业。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB5749生活饮用水卫生标准 GB/T38579生物产品中光合细菌测定 NY/T527光合细菌菌剂 GB20287农用微生物菌剂 NY/T1109微生物肥料生物安全通用技术准则 NY/T798复合微生物肥料 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 光合细菌菌剂inoculantofphotosyntheticbacteria 专指紫色非硫光合细菌，以沼泽红假单胞菌（Rhodopseudomonaspalustris）、荚膜红细菌 （Rhodobactercapsulatus）、类球红细菌（Rhodobactersphaeroides）等菌种，采用有机、无机原 料，经厌氧光照培养制成的活菌制品。 原菌种theoriginalstrain 经由水环境和土壤等自然环境中分离，纯化并且鉴定的菌株。 一级菌种firstlevelstrain 以原菌种经斜面（或摇瓶）种子培养后形成的培养物。 二级菌种secondlevelstrain 将一级种子培养物转接后形成的培养物。 4生产用水和设施设备 生产用水 光合细菌生产用水应符合GB5749中规定的水质要求。 设施设备 4.2.1无菌操作间 具有更衣室，无菌操作台，环境中细菌总数达到一定要求的房间。 4.2.2菌种保藏室 菌种原种保藏和一级菌种暂时存储，宜放置有-80℃冰箱，-20℃冰箱和冷藏柜的房间。 全国团体标准信息平台 T/WSWXH004—2022 24.2.3规模化生产车间 光合细菌二级菌种扩大培养，应配备紫外杀菌灯，碘钨灯照明系统，搅拌罐，透明培养容器，抽吸 水泵，温度计，分光光度计，称量称等。 4.2.4叶面肥调配灌装车间 光合细菌二级菌种调配作物叶面菌肥车间，应配备搅拌罐，灌装设备等容器。 5生产技术流程 生产流程 光合细菌生产应按附录A执行。 一级菌种质量 光合细菌一级菌种应为纯菌株不含杂菌，接种前菌种分光光度检测OD550nm吸光值≥1.5，活菌数 ≥1×1011CFU/L，有效活菌数检测参照国家标准GB/T38579执行。 培养基 光合细菌一级菌种培养基和生产培养基见附录A。 二级菌种 5.4.1培养容器 二级菌种培养使用无色透明的塑料袋培养塑料袋培养，塑料袋厚度0.01～0.12mm，宽度宜为0.3～ 1.0m，长度宜为10～100m；使用透明玻璃容器生产，玻璃容器容量宜为10～20L；柱形亚克力透明玻 璃圆柱，容量宜为0.1～2m3。 5.4.2培养条件 二级菌种培养总体条件为光照强度宜为4000～5000Lx，培养温度宜为25～35℃，培养时间宜为3～ 7天。 5.4.3接种量 一级菌种接入量按二级培养体积的10～20%接入搅拌罐中与培养基重复混匀后，用泵吸入培养容器 中。 5.4.4培养 照明使用500w碘钨灯，每间隔3m放置一个，碘钨灯距离培养容器高度宜为2m。每日取容器中光 合细菌液体对其菌液进行OD550nm吸光值测定，待OD550nm吸光值达到1.5以上停止培养。 光合细菌叶面肥调配 5.5.1叶面肥辅料 叶面肥辅料可包括表面活性剂、糖蜜、柠檬酸、EDTA、生长调节剂等。 5.5.2光合细菌叶面肥调配 将培养好的光合细菌二级菌种用泵吸入搅拌罐中，加入叶面肥辅料，然后打开搅拌转子20～50rpm 转速下将菌体与辅料搅拌均匀。 5.5.3光合细菌叶面肥灌装 调配好的光合细菌叶面肥宜使用自动灌装系统将其装不透明塑料桶中，密封，张贴好商标，商品符 合GB20287规定。 全国团体标准信息平台 T/WSWXH004—2022 35.5.4产品质量 产品质量应符合国家行业标准NY/T527和NY/T798规定。 5.5.5储存 包装好的光合细菌产品应存储放置于仓库，4～15