ICS65.020.30CCSB04团体标准!"#$%&'()%))*+,-./0123456789:;<=TechnicalGuidelinesonCanineRapidDiagnosisInVitro（FluorescenceImmunochromatography） 2022-3-21发布2022-3-21实施>??@A1BCDEFEFEF 全国团体标准信息平台 !"#$%&'()%)) 1GH前前前言言言...........................................................................................................................222引言引言引言...............................................................................................................................3331.1.1.适用范围适用范围适用范围...................................................................................................................4442.2.2.规范性引用文件规范性引用文件规范性引用文件.......................................................................................................4443.3.3.术语和定义术语和定义术语和定义...............................................................................................................4443.1体外诊断........................................................................................................43.2侧流免疫层析................................................................................................44.4.4.技术标准技术标准技术标准...................................................................................................................5554.1采样及样本处理方法....................................................................................54.2犬荧光免疫层析法检测技术标准................................................................64.2.1直接法........................................................................................................64.2.24.2.24.2.2竞争法........................................................................................................9 全国团体标准信息平台 !"#$%&'()%)) 2IIIJJJ本标准按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本指南由中国国际科技促进会提出并归口。本指南由山东鑫桥联康生物工程有限公司、浙江大学山东工业技术研究院、北京鑫桥怡康生物科技有限公司、山东鑫诺生物工程有限公司、枣庄市农业农村事业发展中心负责起草。本指南主要起草人：刘忠，刘青平，杨阳，刘世杰，曹凯，李明鑫。本指南是首次发布。 全国团体标准信息平台 !"#$%&'()%)) 3KKKJJJ为规范小动物-犬体外诊断市场，促进犬体外诊断技术发展，推动建立最佳秩序，促进相关犬体外诊断产品在技术上的互相协调和配合制定本指南。本指南规定了犬快速体外诊断的技术及方法。本指南为首次发布，今后将根据犬快速诊断技术实验要求及技术发展情况适时修订。本指南由山东鑫桥联康生物工程有限公司负责管理，由山东鑫桥联康生物工程有限公司产品研发部负责具体技术内容的解释。为了提高指质量，请各单位在使用过程中，总结经验和积累资料，及时将发现的问题和意见反馈给山东鑫桥联康生物工程有限公司产品研发部以供后续修订时参考。联系方式：山东省枣庄市高新区互联网小镇15号楼4楼，刘忠，邮编：277400，E-mail:[email protected]。 全国团体标准信息平台 !"#$%&'()%)) 4*+,-./0123456789:;<=&.&.&.LMNOLMNOLMNO本指南规定了犬快速体外诊断技术的实验条件要求、实验设计、实施与验证，相关仪器及检测原理等技术要求。本指南可作为检测犬相应生理或病理指标的指导性文件，可供犬快速体外诊断技术研发单位、宠物医院、第三方检测中心及宠物美容院等相关检测人员参考。).).).PNQKMRSPNQKMRSPNQKMRS本指南内容部分引用了下列文件中的条款，凡是注明日期的文件，仅注日期的版本适用于本指南。GB/T14926.57-2008实验动物犬细小病毒检测方法GB/T14926.56-2008实验动物狂犬病病毒检测方法GB/T27532-2011犬瘟热诊断技术T.T.T.2UVWX2UVWX2UVWXT.&-./0体外诊断（InVitroDiagnosis，IVD）是指在人或动物体外，通过对人或动物样本(血液、体液、排泄物、组织等)进行检测而获取临床诊断信息、疾病或机体功能等数据，进而判断疾病或机体功能的状态。体外诊断产品主要由诊断设备（仪器）和诊断试剂构成。T.)YZ89:;侧流免疫层析（lateralflowimmunoassay,LFIA）技术，是将抗原-抗体特异性免疫反应技术和层析技术结合而建立的一种快速检测技术。其原理为待检样品在虹吸作⽤下流经测试区，在侧向流动过程中，待检样品与结合垫和层析膜上的⽣物活性材料（如抗原、抗体、核酸偶联物等）先后发⽣特异性结合，并在层析膜上形成可被检测（或⾁眼可⻅）的检测线和质控线。 全国团体标准信息平台 !"#$%&'()%)) 5侧流免疫层析技术根据检测分⼦⼤⼩和检测原理不同主要分为两种检测⽅法：⼀种为直接法，即双抗体夹⼼法，主要⽤于检测多抗原表位的⽣物⼤分⼦；另⼀种为竞争法，主要⽤于检测半抗原，即不具备免疫原性的⼩分⼦化合物（如激素、药物、毒素及糖等）。侧流免疫层析技术根据检测信号的呈现形式主要可分为定性（或半定量）的胶体⾦免疫层析技术和可定量的荧光免疫层析技术。4.4.4.12[\12[\12[\4.&]^_]^`ab<⽝荧光免疫层析检测法的样本主要可分为：⾎液类（全⾎、⾎清、⾎浆），分泌物类，粪便类等。4.&.&cde⽝常⽤采⾎部位有后肢外侧⼩隐静脉，采⾎时将⽝侧卧或固定在⽝架上，将抽⾎部位的⽑剪去，用乳胶管绑在⽝股部以暴露下肢静脉，由助⼿将⽝固定好。随后⽤碘酒消毒采血部位，再⽤酒精脱碘，使下肢静脉充盈，左手握住采血后肢，右⼿持连有针头的注射器迅速穿刺进⼊静脉，并用左手指将针固定，以适当速度抽⾎。4.&.&.&fc不加任何添加剂的全⾎：⽤移液器量取适量新鲜采集的全⾎加⼊指定的稀释液中，上下颠倒混匀后使⽤；部分项⽬如不需稀释处理，可直接使⽤。室温下采集的全⾎应尽快检测，不宜留存后使⽤。抗凝全⾎：抗凝全⾎是指进⾏了抗凝处理的全⾎样本，⼀般采⽤添加了抗凝剂的采⾎管采⾎。常⽤抗凝采⾎管添加的抗凝剂有肝素，EDTA，枸椽酸钠，草酸盐等。4.&.&.)cg⽤于快速检测的⾎清样本⼀般⽤促凝采⾎管采⾎获得。常⻅的促凝采⾎管有添加了促凝剂的采⾎管和添加了惰性分离凝胶和促凝剂的采⾎管。采集到的的促凝⾎经离⼼沉淀后可分离得到⾎清。4.&.&.Tch 全国团体标准信息平台 !"#$%&'()%)) 6⽤抗凝采⾎管采集到的全⾎，离⼼沉淀后可得到⽤于快速检测的⾎浆。4.&.&.4ijke⽤于⽝快速体外诊断的分泌物类样本主要是眼、⿐和⼝分泌物，可⽤棉签拭⼦在采样部位转3~5圈采集样本。将采样后的棉拭⼦在相应样本稀释液中搅动8~10次，然后将棉头在稀释液管壁按压后取出棉签。4.&.&.5lme粪便样本采集可直接⽤棉签拭⼦挑取适量新鲜的粪便，或⽤棉签拭⼦在⽝肛⻔内壁旋转3~5圈取样。将采样后的棉拭⼦在相应样本稀释液中搅动8~10次，然后将棉头在稀释液管壁按压后取出棉签。静置1min后可⽤于免疫层析检测。4.)*6789:;<no12[\荧光免疫层析检测法根据检测靶标和检测原理的不同可分为直接法和竞争法。4.).&pq<直接法免疫层析技术可用于检测样本中的抗原（病原微生物抗原和自身抗原）分子，也可用于检测血清或血浆中的特异性抗体，用于疫病诊断和