ICS 67.120.30 B 50 T/ZACA 团体标准 T/ZACA 023—2020 水产品中 6种丁香酚类麻醉剂残留量 的测 定 气相色谱 -串联质谱法 Determination of six eugenol anesthetics residues in aquatic products by gas chromatography -tandem mass spectrometry 2020 - 01 - 13发布 2020 - 01 - 19实施 浙江省质量合格评定协会 发布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/ZACA 023 —2020 I 目 次 前言 ................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 原理 .............................................................................. 1 4 试剂和材料 ........................................................................ 1 5 仪器 .............................................................................. 2 6 分析步骤 .......................................................................... 2 7 结果计算 .......................................................................... 4 8 精密度 ............................................................................ 4 9 准确度 ............................................................................ 4 10 灵敏度 ........................................................................... 4 附录A（资料性附录） 6种丁香酚类化合物信息 .......................................... 5 附录B（资料性附录） 6种丁香酚类化合物定量离子对、定性离子对、碰撞能量 .............. 6 附录C（资料性附录） 6种丁香酚类化合物多重反应监测（MRM ）色谱图 ..................... 7 附录D（规范性附录） 实验室内重复性要求 .............................................. 8 附录E（规范性附录） 实验室间再现性要求 .............................................. 9 全国团体标准信息平台 T/ZACA 023 —2020 II 前 言 本标准依据 GB/T 1.1 —2009规定的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由浙江省质量合格评定协会提出并归口。 本标准主要起草单位：绿城农科检测技术有限公司。 本标准参与起草单位： 浙江省食品药品检验研究院 、南京市产品质量监督检验院、 杭州海润泰合检 测技术有限公司 、丽水蓝城农科检测技术有限公司 。 本标准主要起草人：朱萌萌、王川丕、章虎、张永志、周敏、周婷婷、茅佩卿、王远远、杨婷婷、 钱珊珊、凌程江、赵月钧、刘小羽、何晓明、郭利攀、余鹏飞、孙文闪、黎斌、俞璐萍、刘亚楠、王卢燕、章舒祺、卢军 、林文伟、王峰、刘月、叶宇茜。 本标准为首次发布。 全国团体标准信息平台 T/ZACA 023 —2020 1 水产品中 6种丁香酚类麻醉剂残留量的测定 气相色谱 -串联质谱法 1 范围 本标准规定了水产品中6 种丁香酚类麻醉剂残留量的气相色谱- 串联质谱测定方法。 本标准适用于水产品中6 种丁香酚类麻醉剂残留量的测定，其它动物类食品可参照执行。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试样用乙酸乙酯提取， 经乙腈饱和正己烷除脂净化， 采用气相色谱 -串联质谱仪检测， 外标法定量。 4 试剂和材料 水为GB/T 6682 规定的一级水。 4.1 试剂 4.1.1 乙酸乙酯（ C4H8O2）：色谱纯。 4.1.2 乙腈（C2H3N）：色谱纯。 4.1.3 正己烷（C 6H14）：色谱纯 。 4.1.4 丙酮（C3H6O）：色谱纯。 4.1.5 磷酸（H3PO4）：优级纯。 4.1.6 磷酸二氢钾 （KH 2PO4）：优级纯。 4.1.7 乙腈饱和正己烷溶液：量取 200 mL正己烷（4.1.3 ）于250 mL分液漏斗中，加入 400 mL乙腈 （4.1.2），剧烈振摇数分钟，静置分层，弃去下层乙腈。 4.1.8 磷酸二氢钾 溶 液 ：取磷酸二氢钾 1.36 g（4.1.6） ， 用水溶解并稀释至 1 000 mL，用 磷 酸（ 4.1.5） 调节pH至4.0。 4.2 标准品 6种丁香酚类麻醉剂标准品，参见附录 A，纯度≥ 98.5%。 4.3 标准溶液配制 全国团体标准信息平台 T/ZACA 023 —2020 2 4.3.1 标准储备溶液（ 1 000 mg/L）：分别准确称取 6种丁香酚类化合物标准品各 10.0 mg（精确至 0.0001 g），用丙酮溶解并定容至 10.0 mL， 4℃避光密封保存，有效期 1年。 4.3.2 混合标准储备 溶液：将 6种丁香酚类化合物标准储备溶液（4.2.1 ）用丙酮稀释成10.0 mg/L 的混合标准 储备溶液，4℃避光密封保存，有效期 1年。 4.3.3 基质混合标准工作溶液：空白基质溶液氮气吹至近干，加入 2 mL相应质量浓度的混合标准 储备 溶液复溶，过微孔滤膜，基质混合标准工作溶液应现用现配。 4.3.4 标准工作曲线： 准确吸取一定量的混合标准溶液，逐级用丙酮稀释成质量浓度为 0.005 mg/L、 0.01 mg/L 、0.02 mg/L、 0.04 mg/L、 0.08 mg/L、0.16 mg/L、0.32 mg/L 的标准工作溶液。空白基质 溶液氮气吹至近干，分别加入 1.0 mL上述标准工作溶液复溶，过 0.22 μm有机滤膜配制成系列基质混 合标准工作溶液，供气相色谱- 串联质谱仪测定。以化合物定量离子峰面积为纵坐标，化合物标准溶液 质量浓度为横坐标，绘制标准曲线。 注：空白基质溶液取样量应与相应的试样处理取样量一致。 5 仪器 5.1 气相色谱- 三重四级杆质谱联用仪：配电子轰击源（ EI）。 5.2 分析天平：感量 0.1 mg和0.01 g。 5.3 冷冻离心机：转速不低于 12 000 r/min 。 5.4 涡旋振荡器。 5.5 超声波振荡器。 5.6 均质机。 5.7 氮吹仪。 5.8 冰箱：冷冻温度不低于- 18 ℃。 6 分析步骤 6.1 试样制备 鱼类清洗后，去头、骨、内脏，取肌肉等可食部位绞碎混合均匀；虾类清洗后，去虾头、虾皮、肠 腺，得到整条虾肉绞碎混合均匀 ；贝类清洗后，收集全部的软组织和体液匀浆，混合均匀， -18 ℃以下 冷冻保存，备用。 6.2 提取 称取2 g试样（精确至0.01 g）于 50 mL具塞离心管中，加入5 mL 磷酸二氢钾溶液（4.1.8） ，8 mL乙 酸乙酯（4.1.1） ，盖上离心管盖，涡旋混匀1 min ，超声提取20 min，12000 r/min 离心3 min ，上清液转 移至另一50 mL 具塞离心管中；残渣中再加入 8 mL乙酸乙酯（ 4.1.1）重复提取一次，合并所有上清液。 将提取液室温下氮气吹至近 干，加2 mL乙腈（4.1.2）使溶解，转移至1 0 mL玻璃刻度管中，离心管用2mL 乙腈（ 4.1.2）洗涤一次，洗涤液合并入10 mL 玻璃刻度管中 ，待净化。 6.3 净化 将刻度管置于- 18℃下冷冻 2 h，取出后在 4℃、 4000 r/min条件下离心 3 min。将上清液转移至另一10 mL刻度管中， 向该刻度